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xiaoyuan588

银虫 (小有名气)

[求助] 有谁用生物素和亲和素的?他们的结合条件是怎么样的? 已有2人参与

如题,我正在一个固体分别接上生物素和亲和素,然后让他们结合,可是一直没做出来,有谁知道他们的结合条件吗?尽量详细点,谢谢了。
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xiaoyuan588

银虫 (小有名气)

没有人吗
2楼2014-04-09 21:23:50
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dut_berlin

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
likedong1021: 金币+1, 欢迎来生物材料版回帖交流 ! 2014-04-10 23:26:50
xiaoyuan588(likedong1021代发): 金币+3 2014-07-13 21:09:52
正常情况生物素和四价亲和素亲和常数能有~10^15,你都洗不下来的。。不需要什么条件,你确定亲和素是有活性的and固载上去了?
3楼2014-04-10 23:13:48
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xiaoyuan588

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dut_berlin at 2014-04-10 23:13:48
正常情况生物素和四价亲和素亲和常数能有~10^15,你都洗不下来的。。不需要什么条件,你确定亲和素是有活性的and固载上去了?

你好,怎么确定亲和素的活性呢,求解
4楼2014-04-11 09:11:48
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xiaoyuan588

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dut_berlin at 2014-04-10 23:13:48
正常情况生物素和四价亲和素亲和常数能有~10^15,你都洗不下来的。。不需要什么条件,你确定亲和素是有活性的and固载上去了?

还有他们的结合温度和PH是多少
5楼2014-04-11 10:24:43
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dut_berlin

金虫 (初入文坛)

★
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2014-04-11 19:44:23
引用回帖:
5楼: Originally posted by xiaoyuan588 at 2014-04-11 10:24:43
还有他们的结合温度和PH是多少...

温度室温,pH生理条件吧,7~8
6楼2014-04-11 18:51:21
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希思heowns

捐助贵宾 (初入文坛)


【答案】应助回帖

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★ ★ ★
likedong1021: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流! 2014-05-23 19:02:01
xiaoyuan588(likedong1021代发): 金币+2 2014-07-13 21:10:04
首先生物素和亲和素之间的结合力是很强的,不受温度 PH等环境影响, 其次生物素如果想要和固体基质或者其他大分子结合之前需要活化,这部分可以让外面的公司做。如果是链霉亲和素要结合到固体基质上,需要使用一些交联剂引入活性基团然后将其固定在磁珠玻璃板等固体基质上。

这里有篇博客讲常见使用问题的:http://blog.sina.com.cn/s/blog_130c12c6a0101rxpe.html
7楼2014-05-23 09:54:45
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杨裕小朋友

新虫 (初入文坛)

我们一般是保持37度,pH选择的是1xPBS, 250或350转数下孵育一个小时。
8楼2014-11-21 15:58:22
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