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szp0401

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[求助] 磁珠生物素 PCR 已有1人参与

引物用生物素修饰了可以吸附到磁珠上面，但PCR之后的PCR产物却吸不到上面或者说吸附量很小，为什么

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1楼 2012-05-30 17:02:07

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yingyangyang

木虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+3, 鼓励热心交流~直接“快速回复主题”是没有传图片的功能，需点击“回复帖子”，在新的页面里就有传图片、附件的功能了。 2012-05-31 09:32:11

你做的是文库构建吗？是不是RNa-Seq? 我有这个过程图，但是这里发不了图片给你看！只能文字描述下，但是怕描述不清楚呢！
带生物素的引物与DNA片段一端连接，加5’端接头与DNA片段的另一端连接，然后反转录，带生物素的引物开始按照DNA模板延伸；然后PCR以带生物素的cDAN为模板扩增出来的片段不会带有生物素。

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2楼2012-05-30 22:08:41

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szp0401

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2楼: Originally posted by yingyangyang at 2012-05-30 22:08:41
你做的是文库构建吗？是不是RNa-Seq? 我有这个过程图，但是这里发不了图片给你看！只能文字描述下，但是怕描述不清楚呢！
带生物素的引物与DNA片段一端连接，加5’端接头与DNA片段的另一端连接，然后反转录 ...

谢谢你，我不是构建文库，我只制备单链DNA

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3楼2012-05-31 18:08:16

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