应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE做了两次，图片相差很大，还有空白对照也有条带。
231/3返回列表123下一页
查看: 1953  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiaoyujun123

铜虫 (初入文坛)

[求助] DGGE做了两次，图片相差很大，还有空白对照也有条带。

图片1和图片2是相同的样品，属于土壤DNA，只是每次跑DGGE都是重新跑的PCR。结果两次相差这么大呢。高手能不能指点一下。究竟是什么原因造成这样的。两张图片颜色很黄，背景颜色相差不是很大，染色的时候怎么去改正。或者注意哪些方面。

1



2
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-30 13:47:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

elbo

金虫 (小有名气)
看你PCR的目的条带亮度（也就是量）如何，另外建议纯化一下，我的PCR产物纯化和未纯化跑出来差距较大
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-06-08 07:21:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

西瓜
2楼2012-05-31 09:18:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-06 18:39:55
首先从跑胶的结果来看，PCR产物可能不够好。每个泳道上部都有很深的背景色。
其次，配置的DGGE凝胶每次可能会有所不同，另外电泳条件的改变特别是电泳时间的变化对电泳结果也会有一定的影响。
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-01 10:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

树上的鱼X

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-06-06 18:40:02
你的是用的银染方法吧 第二张图条带感觉还可以 第一张图片颜色背景色偏深偏黄 应该是染色时间偏长造成的
赞一下 回复此楼
4楼2012-06-06 15:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

侯云hy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiadongliang at 2012-06-01 10:30:48
首先从跑胶的结果来看，PCR产物可能不够好。每个泳道上部都有很深的背景色。
其次，配置的DGGE凝胶每次可能会有所不同，另外电泳条件的改变特别是电泳时间的变化对电泳结果也会有一定的影响。

你好，我也遇到相同的困难，如果说泳道颜色比较深是因为PCR不好，那该怎样优化啊？我已经做了巢式和降落了，但是还是颜色深。求指教啊。
赞一下 回复此楼
5楼2012-06-07 18:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

侯云hy

金虫 (小有名气)
楼主，我也遇到同样的问题，你的解决了吗？
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-07 18:18:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-08 14:14:03
引用回帖:
5楼: Originally posted by 侯云hy at 2012-06-07 18:18:21
你好，我也遇到相同的困难，如果说泳道颜色比较深是因为PCR不好，那该怎样优化啊？我已经做了巢式和降落了，但是还是颜色深。求指教啊。...

纯化下吧。
不知道你的PCR酶是什么公司的？一些小公司的酶不是太好，最好使用好一点儿的酶。虽然琼脂糖检测都是单一的条带，有的公司的酶扩增的产物电泳就是很好。
赞一下 回复此楼
8楼2012-06-08 13:46:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

侯云hy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiadongliang at 2012-06-08 13:46:48
纯化下吧。
不知道你的PCR酶是什么公司的？一些小公司的酶不是太好，最好使用好一点儿的酶。虽然琼脂糖检测都是单一的条带，有的公司的酶扩增的产物电泳就是很好。...

我用的是TAKALA 的 EX Taq酶，这个酶可以吗？你用的是哪个啊？
赞一下 回复此楼
9楼2012-06-09 09:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

侯云hy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by elbo at 2012-06-08 07:21:56
看你PCR的目的条带亮度（也就是量）如何，另外建议纯化一下，我的PCR产物纯化和未纯化跑出来差距较大

我之前也试过纯化和未纯化的比较，差别比较大，然后我导师就不让我纯化，可是不纯化泳道颜色好深啊。你有没有遇到这种情况啊？
赞一下 回复此楼
10楼2012-06-09 09:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoyujun123 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[考研] 304求调剂 +7 castLight 2026-04-16 7/350 2026-04-17 20:05 by 关一盏灯cd
[考博] 求博导｜生物质基多孔碳/超级电容方向，已有相关成果，寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 297，工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[考研] 327求调剂 +26 Xxjc1107. 2026-04-13 29/1450 2026-04-16 10:52 by Espannnnnol
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +9 lzmk 2026-04-14 10/500 2026-04-15 20:02 by 学员JpLReM
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 293求调剂 +16 我爱高数高数爱� 2026-04-12 18/900 2026-04-13 21:47 by 学员JpLReM
[考研] B区0809 ，数一英一，290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 297工科，求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 。 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭