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学术骗子小刚

银虫 (小有名气)

[求助] nosZ扩增不出来

小弟想扩增土壤中 nosZ基因, used primers nosZ-F (5 9-CGY TGT TCM TCG ACA
GCC AG-3 9 ) and nosZ 1622R (59 -CGS ACC TTS TTG
CCS TYG CG-39 )   PCR程序如下:94℃ for 5 min; 33 cycles of 94℃for 45 s, 56℃for 1 min, 72℃ for 1 min. 但是老是扩增不出目的片段  整个泳道全是拖带   高保真酶也试过   文章里面也是这个引物和程序   求助什么原因造成的呀
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加油加油
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hybg0418

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的引物跟你的一样,我也扩增不出来,并且阴性特异性很强的时候目的片段有条带,阴性没了,目的片段也没了,唯一一次没有阴性并且P出来的条带还不是很亮。用的是premix ex taq。高保真性的酶,不过太贵了。你现在解决没
2楼2012-07-24 19:44:20
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