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805085868

铁虫 (小有名气)

[求助] 新手求助对基因敲除以及HPLC熟知的高手

我敲掉了一个基因,发现这种链霉菌还是产抗生素,现在的问题是:这个基因的敲除株与野生株对比之后虽然还是产抗生素,但不知道有没有量的变化,如果可以定量的话就可以分析一下,但现在不知道怎么定量,有这方面经验的朋友们帮忙一下,谢谢了。
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俺只是个小硕
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805085868

铁虫 (小有名气)

我只是做了一个HPLC,发现在特定的保留时间下还是出峰了,不知道怎么定量所以只是看了一下有峰,初步判定还是产抗生素,但不是不知道可比可以定量分析
俺只是个小硕
2楼2012-05-26 19:39:35
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gujiahui

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-05-27 17:08:43
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huxx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-05-27 21:59:50
可以定量. 相同的条件, 如果峰面积相同, 则表达量没有变化. 对应的峰面积就代表产量.
4楼2012-05-27 21:14:15
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看峰面积吧,要保证各种处理方法都相同的,不过感觉不是很准
5楼2012-05-28 08:50:28
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

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从产物量上来比较,色谱峰面积可以定量,但是准确性不高,你要设置一个内参或是标准样,但整体比较难!我建议可以用RTPCR在相关基因表达水平上进行定量,发文章时肯定得有这方面的数据!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Tobeornottobe,that'saproblem
6楼2012-05-28 08:59:27
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你做一个标准样品,比如购买一个它产生的抗生素,之后做一个标曲,再同样条件下,做你的野生株和突变株,就可以根据峰面积和响应值做定量 了
7楼2012-05-28 14:44:03
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cai3110274

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
积分看峰面积吧 买标样 打标方 然后对比出峰时间 不是很准
夫天地者万物之逆旅
8楼2012-05-28 18:10:39
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