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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新手求助对基因敲除以及HPLC熟知的高手
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805085868

铁虫 (小有名气)

[求助] 新手求助对基因敲除以及HPLC熟知的高手

我敲掉了一个基因，发现这种链霉菌还是产抗生素，现在的问题是：这个基因的敲除株与野生株对比之后虽然还是产抗生素，但不知道有没有量的变化，如果可以定量的话就可以分析一下，但现在不知道怎么定量，有这方面经验的朋友们帮忙一下，谢谢了。
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俺只是个小硕
1楼 2012-05-26 19:36:09
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805085868

铁虫 (小有名气)
我只是做了一个HPLC，发现在特定的保留时间下还是出峰了，不知道怎么定量所以只是看了一下有峰，初步判定还是产抗生素，但不是不知道可比可以定量分析
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俺只是个小硕
2楼2012-05-26 19:39:35
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gujiahui

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2012-05-27 17:08:43
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huxx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-05-27 21:59:50
可以定量. 相同的条件, 如果峰面积相同, 则表达量没有变化. 对应的峰面积就代表产量.
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4楼2012-05-27 21:14:15
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hyacinth326

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看峰面积吧，要保证各种处理方法都相同的，不过感觉不是很准
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5楼2012-05-28 08:50:28
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从产物量上来比较，色谱峰面积可以定量，但是准确性不高，你要设置一个内参或是标准样，但整体比较难！我建议可以用RTPCR在相关基因表达水平上进行定量，发文章时肯定得有这方面的数据！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Tobeornottobe,that'saproblem
6楼2012-05-28 08:59:27
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你做一个标准样品，比如购买一个它产生的抗生素，之后做一个标曲，再同样条件下，做你的野生株和突变株，就可以根据峰面积和响应值做定量 了
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7楼2012-05-28 14:44:03
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cai3110274

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
积分看峰面积吧 买标样 打标方 然后对比出峰时间 不是很准
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夫天地者万物之逆旅
8楼2012-05-28 18:10:39
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