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foreverjohn

金虫 (小有名气)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳到大约距离底部1/3处出现问题条带扭曲

最近试验要用到Tricine-SDS-PAGE电泳,试验方案根据Nature Protocol, 2006, 1(1):16-22所述。配制了阳极buffer和阴极Buffer,配胶时使用加甘油的3X Gel Buffer。电泳的装置为垂直电泳系统,电泳时先30 V约30 min-60 min,然后加大电压至60-80V,胶浓度有12%或16%,外层电泳液加满或者加1/3-1/2处,室温或者放在4oC冷库电泳,在所有上述情况下均出现当溴酚蓝跑道距离底部1/3处条带扭曲的情况。望有经验的童鞋给些建议。

大图



电泳装置
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foreverjohn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-05-24 11:58:11:
底部有气泡,赶一下气泡就好了

我也考虑过这个问题,一般SDS-PAGE时倒外层电泳液时都是将电泳槽倾斜后倒入,基本上没有气泡,感谢你的回复,我下次再特意留心这个问题。
3楼2012-05-24 18:19:43
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
底部有气泡,赶一下气泡就好了
2楼2012-05-24 11:58:11
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njndzlq

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能是配胶的问题,下次甘油另加试试吧,仅供参考哦
4楼2012-06-02 23:05:30
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kid0i

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也遇到这种情况了,同求解,自己换过所有的东西都不见效。。。LZ现在还有这种情况吗?我怀疑可能跟pH值有关。望知道的同学提示,灰常感谢!
5楼2012-06-03 17:44:47
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