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foreverjohn

金虫 (小有名气)

[求助] Tricine-SDS-PAGE电泳到大约距离底部1/3处出现问题条带扭曲

最近试验要用到Tricine-SDS-PAGE电泳，试验方案根据Nature Protocol, 2006, 1(1):16-22所述。配制了阳极buffer和阴极Buffer，配胶时使用加甘油的3X Gel Buffer。电泳的装置为垂直电泳系统，电泳时先30 V约30 min-60 min，然后加大电压至60-80V，胶浓度有12%或16%，外层电泳液加满或者加1/3-1/2处，室温或者放在4oC冷库电泳，在所有上述情况下均出现当溴酚蓝跑道距离底部1/3处条带扭曲的情况。望有经验的童鞋给些建议。

大图



电泳装置
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1楼 2012-05-23 21:26:28
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qjy_134

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
底部有气泡，赶一下气泡就好了
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2楼2012-05-24 11:58:11
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foreverjohn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-05-24 11:58:11:
底部有气泡，赶一下气泡就好了

我也考虑过这个问题，一般SDS-PAGE时倒外层电泳液时都是将电泳槽倾斜后倒入，基本上没有气泡，感谢你的回复，我下次再特意留心这个问题。
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3楼2012-05-24 18:19:43
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njndzlq

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有可能是配胶的问题，下次甘油另加试试吧，仅供参考哦
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4楼2012-06-02 23:05:30
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kid0i

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也遇到这种情况了，同求解，自己换过所有的东西都不见效。。。LZ现在还有这种情况吗？我怀疑可能跟pH值有关。望知道的同学提示，灰常感谢！
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5楼2012-06-03 17:44:47
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37wangsaiq

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们配的胶都是没有甘油的，没有出现条带弯曲的现象，不知道是否有关系
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6楼2012-06-06 09:06:02
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kid0i

铁虫 (初入文坛)
请问楼主，你所有的东西都换过吗？我貌似连水都换过了也不管用啊！！！挤死了！求各位大神帮忙！！！
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7楼2012-06-06 14:43:42
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foreverjohn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kid0i at 2012-06-06 14:43:42
请问楼主，你所有的东西都换过吗？我貌似连水都换过了也不管用啊！！！挤死了！求各位大神帮忙！！！

把Buffer根据要求重新配吧，后来我师妹重新配了buffer后就没有问题了，跟甘油没有关系的。
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8楼2012-07-28 00:16:31
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tianfu1899

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2018-02-24 17:36:13
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