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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求教！！PAGE胶出现的诡异结果，加急！！
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暮寒

金虫 (正式写手)

[交流] 求教！！PAGE胶出现的诡异结果，加急！！

这两天的实验中遇到了一个非常诡异的问题，想问问大家，有没有遇到过类似的情况~~~

非变性聚丙烯凝胶电泳跑出来，胶上的marker是正常的，但所有的DNA样一点点都没有往下走，全部在点样口处，能看得出基本都有产物，就是不往下面走，可是marker又是正常的梯度，一个条带不少，这到底是肿么回事？？

如果是断路了，那么marker应该也不动，可就是marker正常！！！
这几天就为找原因搞得头都大了，能换的试剂和溶液基本都换了一遍，引物也是新的，实在想不出招了

有做过这类实验的同仁们，请赐教！！！
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yuluoqiutong

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1楼 2012-05-06 20:51:25
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youngker918

金虫 (正式写手)
★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
第一，可能是是你做的蛋白的分子太大，而跑不下去，把胶的浓度调稀；
第二，可能是样品中有比较多的离心渣堵塞胶孔，所以楼主可能要多离几次心；
第三，最悲催的是楼主研究的蛋白的等电点高于电泳缓冲液的pH，所以解决办法是要做酸性电泳了，关于酸性电泳具体的我没有做过，只是听过。
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23楼2012-05-07 18:54:35
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对吻鱼

荣誉版主 (文坛精英)
★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
建议你去专业版发帖询问一下~~
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2楼2012-05-06 21:28:50
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lppv

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
silicare: 金币+1, 过来我教你 2012-05-07 08:31:18
这个真不懂，胶啊 电泳啊。，。。没做过
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3楼2012-05-06 21:31:00
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brown437

新虫 (初入文坛)
★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
可能的原因是胶的孔径过小，不知道你的样品是纯DNA 又或者是DNA-protein的complex，如果你的样品的size较大，可能不能通过孔径，所以都留在了well里。
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5楼2012-05-06 21:54:34
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