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求教!!PAGE胶出现的诡异结果,加急!!
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暮寒
金虫
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(幼儿园)
金币: 1516.6
帖子: 681
在线: 256.4小时
虫号: 740825
[交流]
求教!!PAGE胶出现的诡异结果,加急!!
这两天的实验中遇到了一个非常诡异的问题,想问问大家,有没有遇到过类似的情况~~~
非变性聚丙烯凝胶电泳跑出来,胶上的marker是正常的,但所有的DNA样一点点都没有往下走,全部在点样口处,能看得出基本都有产物,就是不往下面走,可是marker又是正常的梯度,一个条带不少,这到底是肿么回事??
如果是断路了,那么marker应该也不动,可就是marker正常!!!
这几天就为找原因搞得头都大了,能换的试剂和溶液基本都换了一遍,引物也是新的,实在想不出招了
有做过这类实验的同仁们,请赐教!!!
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yuluoqiutong
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2012-05-06 20:51:25
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youngker918
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★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
第一,可能是是你做的蛋白的分子太大,而跑不下去,把胶的浓度调稀;
第二,可能是样品中有比较多的离心渣堵塞胶孔,所以楼主可能要多离几次心;
第三,最悲催的是楼主研究的蛋白的等电点高于电泳缓冲液的pH,所以解决办法是要做酸性电泳了,关于酸性电泳具体的我没有做过,只是听过。
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23楼
2012-05-07 18:54:35
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对吻鱼
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★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
建议你去专业版发帖询问一下~~
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2楼
2012-05-06 21:28:50
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lppv
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★ ★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
silicare: 金币+1, 过来我教你
2012-05-07 08:31:18
这个真不懂,胶啊 电泳啊。,。。没做过
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3楼
2012-05-06 21:31:00
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brown437
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★
暮寒(金币+1): 谢谢参与
可能的原因是胶的孔径过小,不知道你的样品是纯DNA 又或者是DNA-protein的complex,如果你的样品的size较大,可能不能通过孔径,所以都留在了well里。
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5楼
2012-05-06 21:54:34
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