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求教!!PAGE胶出现的诡异结果,加急!!
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这两天的实验中遇到了一个非常诡异的问题,想问问大家,有没有遇到过类似的情况~~~ 非变性聚丙烯凝胶电泳跑出来,胶上的marker是正常的,但所有的DNA样一点点都没有往下走,全部在点样口处,能看得出基本都有产物,就是不往下面走,可是marker又是正常的梯度,一个条带不少,这到底是肿么回事?? 如果是断路了,那么marker应该也不动,可就是marker正常!!! 这几天就为找原因搞得头都大了,能换的试剂和溶液基本都换了一遍,引物也是新的,实在想不出招了 有做过这类实验的同仁们,请赐教!!! |
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暮寒(金币+1): 谢谢参与
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加样孔比较亮一般5个原因,有DNA片段太大、或者蛋白质杂质还有一种比较少的可能DNA浓度太高(上样量太大)、凝胶浓度太高、或者凝胶制作时未完全融化在加样孔处阻滞了部分样品。 聚丙烯酰胺凝胶浓度太大,DNA分子量大,进不去凝胶---跑个琼脂糖试一试就可以;DNA样品本身就有问题,可能就没有DNA存在,只是一些杂质蛋白--通过紫外分光检测可以排除!DNA浓度过高,一般DNA溶液会很粘稠不容易吸取,在样品加样时就能发现;凝胶浓度高,试一试琼脂糖凝胶0.8%基本可以解决问题;凝胶制作问题,那你就自己反省吧! 以上所有情况本人都切身遇到过! 如果都不是,那你就想上帝祷告吧! [ Last edited by wuweibewin on 2012-5-7 at 11:25 ] |
17楼2012-05-07 11:24:02







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