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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

[求助] 有关质粒转化结果

质粒转化的实验中阴性对照没长菌,但是转化平板上过夜培养后没长菌,更长时间才长,这是为什么?
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O(∩_∩)O哈哈~
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-04-16 00:54:11
楼主的宿主菌是大肠还是其他,如果是大肠,那就去楼上大家所言那样,是杂菌。若不是大肠,可能是因为质粒上的抗性基因在你的宿主菌内需要较长时间才表达,比如农杆菌作为宿主转化后,在抗性板子上一般要两天才长出阳性菌落。
6楼2012-04-15 00:13:55
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查看全部 18 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 应助指数+1, 斑斑辛苦 2012-04-13 14:11:37
chenxueqiao: 金币+5, 有帮助 2012-04-13 19:40:29
你这转化基本废了……
这种情况,长时间后长起来的是不带质粒的杂菌。抗生素的活性只能维持一段时间,常见的氨苄青霉素(Amp)在37℃大约能维持16小时(也就是过夜),时间太长后就失效了。一般抗生素只能抑制杂菌生长,并不能杀死它们,所以抗生素失效之后,杂菌就能长起来了。
以后做转化,过夜之后没长起来,果断重做吧,祝顺利
2楼2012-04-12 23:56:57
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-12 23:56:57:
你这转化基本废了……
这种情况,长时间后长起来的是不带质粒的杂菌。抗生素的活性只能维持一段时间,常见的氨苄青霉素(Amp)在37℃大约能维持16小时(也就是过夜),时间太长后就失效了。一般抗生素只能抑制杂 ...

但是阴性平板上没长菌。如果氨苄失效的话,是不是阴性平板上也应该长菌啊?
O(∩_∩)O哈哈~
3楼2012-04-13 08:10:36
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenxueqiao at 2012-04-13 08:10:36:
但是阴性平板上没长菌。如果氨苄失效的话,是不是阴性平板上也应该长菌啊?

你阴性对照是什么做的?
4楼2012-04-13 19:49:58
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