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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

[求助] 有关质粒转化结果

质粒转化的实验中阴性对照没长菌,但是转化平板上过夜培养后没长菌,更长时间才长,这是为什么?
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-12 23:56:57:
你这转化基本废了……
这种情况,长时间后长起来的是不带质粒的杂菌。抗生素的活性只能维持一段时间,常见的氨苄青霉素(Amp)在37℃大约能维持16小时(也就是过夜),时间太长后就失效了。一般抗生素只能抑制杂 ...

但是阴性平板上没长菌。如果氨苄失效的话,是不是阴性平板上也应该长菌啊?
O(∩_∩)O哈哈~
3楼2012-04-13 08:10:36
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-13 19:49:58:
你阴性对照是什么做的?

是在含氨苄的平板上接没转质粒的菌

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O(∩_∩)O哈哈~
5楼2012-04-14 08:24:13
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

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6楼: Originally posted by bonbonzd at 2012-04-15 00:13:55:
楼主的宿主菌是大肠还是其他,如果是大肠,那就去楼上大家所言那样,是杂菌。若不是大肠,可能是因为质粒上的抗性基因在你的宿主菌内需要较长时间才表达,比如农杆菌作为宿主转化后,在抗性板子上一般要两天才长出 ...

是大肠,应该是杂菌了
O(∩_∩)O哈哈~
7楼2012-04-15 08:29:41
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by diy患者 at 2012-04-15 21:35:53:
1.先确定是不是大肠,如果是,那说明可能你的amp浓度太低了。
2.不是大肠,说明污染了,有些杂菌天生抗amp

转化平板(amp培养基上接转了质粒的大肠)二十多个小时后长得菌不确定是不是大肠,但是因为阴性对照(在amp培养基上接没转质粒的大肠)上没长,是不是可以基本上认为是杂菌,另外,我加的amp的量是100的。
O(∩_∩)O哈哈~
13楼2012-04-16 16:35:42
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chenxueqiao

木虫 (正式写手)

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10楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-04-16 00:53:59:
不好意思,之前不知怎么没看到……可能是阴性对照放久了,抗生素失效,没转化的菌也能长起来了。

没关系……阴性对照上没长菌的
O(∩_∩)O哈哈~
14楼2012-04-16 16:37:13
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