24小时热门版块排行榜    

查看: 9141  |  回复: 7

danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 提取DNA的时候,为什么要用醋酸钾,用醋酸钠代替或者醋酸钾+氯化钾是否可行?

醋酸钾的作用是什么,仅仅是提供钾离子吗,提供的钾离子发挥什么作用呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-12 13:38:30
danyzj01: 回帖置顶 2012-04-21 09:34:30
引用回帖:
5楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-11 22:51:26:
请问你用的是什么方法,是文献的还是自己摸索或改进的呢

我们提取植物gDNA,一般采取CTAB法,文献中本来就有改进过多个的版本,我们采取合适的版本,至今沿用下来,没有改过
提取RNA时,采用TRIzol法,我自个按照文献方案进行了20+以上的提取,发现一直存在有A260/230比值过低的问题,最后根据手头资料改进后续步骤后,继续试验5+以上次数后确定有效,才做自行修订方案的。
国外有影响的杂志对实验的重复性要求很高,所以对实验方案的描述要求都是严之又严,采用这类杂志的方案普遍都是没有问题的,若有改进也是在重复多次发现问题反复出现后才思考改进的。
Let God do with it as He wills
6楼2012-04-11 23:04:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流! 2012-04-11 17:24:20
danyzj01: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2012-04-21 09:37:35
嗯.................
你指的是核酸共沉剂吗,我一般用NaAc,NaCl,KAc木有用过,不过按照共沉剂的作用是提供一价阳离子中和DNA的负电荷,从而中和DNA分子间排斥作用,以达到共沉淀的效果来看,K离子也是可以用的,但具体没有应用过,不敢乱说
个人看法,若有说错请高手指正
Let God do with it as He wills
2楼2012-04-11 14:06:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danyzj01

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-11 14:06:05:
嗯.................
你指的是核酸共沉剂吗,我一般用NaAc,NaCl,KAc木有用过,不过按照共沉剂的作用是提供一价阳离子中和DNA的负电荷,从而中和DNA分子间排斥作用,以达到共沉淀的效果来看,K离子也是可以用的 ...

他这个方法前面有加NaAC和NaCL,后面又加了点KAC,不知道能否全部替换成NaAC,纯纳离子也是没关系才对吧?
那么有EDTA参与的溶剂可以全部替换成EDTA二钠来使用吗?
3楼2012-04-11 21:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流~ 2012-04-11 22:00:36
引用回帖:
3楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-04-11 21:32:30:
他这个方法前面有加NaAC和NaCL,后面又加了点KAC,不知道能否全部替换成NaAC,纯纳离子也是没关系才对吧?
那么有EDTA参与的溶剂可以全部替换成EDTA二钠来使用吗?

1. 如果你是按照某人的文献方法,那在做出结果前一定按照原方法来,不管有多么麻烦,若你重复出结果后,再有空考虑改方法
2. EDTA再溶液中溶解的条件基本都要pH8.0以上了,如果没法溶解,你还要调pH,加NaOH就等同用了二钠,所以没有特定说明下,EDTA和其二钠盐没有区别.......至少偶现在还么见过
Let God do with it as He wills
4楼2012-04-11 21:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danyzj01

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-11 21:40:10:
1. 如果你是按照某人的文献方法,那在做出结果前一定按照原方法来,不管有多么麻烦,若你重复出结果后,再有空考虑改方法
2. EDTA再溶液中溶解的条件基本都要pH8.0以上了,如果没法溶解,你还要调pH,加NaOH就等 ...

请问你用的是什么方法,是文献的还是自己摸索或改进的呢
5楼2012-04-11 22:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyy4581

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-13 18:33:15
额,问题说得不是很清楚,如果是加了EDTA后再用醋酸钾,估计是为了使聚沉更彻底,因为乙二胺四乙酸二钾的溶解度比乙二胺四乙酸二钠更小,更容易沉淀彻底。。。
7楼2012-04-13 16:16:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白玉子双

金虫 (小有名气)

醋酸钾的作用是为了减少DNA 的降解,促进DNA与蛋白质的分离。钾离子的作用是为了和提取DNA的Buffer中的EDTA形成沉淀,更利于反冲液的去除,提高DNA 的纯度。
独立做自己
8楼2015-07-29 11:23:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 danyzj01 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 aOn84t7OD1JN 2026-08-19 4/200 2026-08-19 22:31 by BqkHsOAGISWU
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 PnssoZglMj3v 2026-08-19 4/200 2026-08-19 22:28 by BqkHsOAGISWU
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 PnssoZglMj3v 2026-08-19 4/200 2026-08-19 22:16 by BqkHsOAGISWU
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +54 医学老男孩 2026-08-13 121/6050 2026-08-19 20:28 by 医学老男孩
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 cHIDTWCTtLlG 2026-08-19 6/300 2026-08-19 18:52 by oCMhZAsgNFoO
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 PnssoZglMj3v 2026-08-19 5/250 2026-08-19 17:42 by oCMhZAsgNFoO
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
信息提示
请填处理意见