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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 植物基因组DNA的提取，求实验指导啊。
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maoxuequn

新虫 (小有名气)

[求助] 植物基因组DNA的提取，求实验指导啊。 已有3人参与

一直用上海生工的快速植物基因组试剂盒提取，
可是提取的基因就是不理想啊不理想。
为什么啊？
我们实验室提取的时候 注意的点是 加两次PP，然后乙醇挥发的时候要挥发干 而不是10分钟就好。
可是我就是提取的不好，RNase降解酶也有，然后液氮也是快速研磨，叶子也是新鲜嫩叶子。
可是我尝试了很多次，就是提取不好。
求实验指导啊。
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1楼 2015-12-25 09:45:43
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xygcdmr

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先提的不好具体是什么情况，蛋白多，弥散，还是DNA量少？不能指导太多
几点经验：1 研磨充分、取样不要太多（提取液能力有限）；
               2 你那个盒子没用过，但是都应该操作严格（静置，混匀，离心等）；
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2楼2015-12-25 21:47:20
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溪偌飘纤

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们实验室用的是改良CTAB法，操作时间长，可是效果特别好，我们一般都提老标本的，像楼主的的新鲜叶片用此种方法应该更没问题吧
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3楼2016-01-04 09:57:30
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雨儿天0320

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们实验室用的是TaKaRa的试剂盒，提取植物DNA还不错，但是也要严格按照方法操作，才能更稳定
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4楼2016-01-04 10:52:28
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反应链

新虫 (正式写手)
You could try this protocol, which is very useful for plant total DNA extraction.

I hope you could improve the CTAB method for Soil microorganism total DNA extraction by drawing lessons from this protocol.

3% CTAB DNA extracion protocol
(modified from Zeng et al. 2002, ACta Botanica Sinica 44; 694-697)

1. washing out polysaccharides with CTAB-free buffer from homogenate.
2. increasing the percentage of CTAB in extraction medium.
3. using high concentration salts pior to DNA precipitation with isopanol.

植物基因组DNA的提取，求实验指导啊。
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5楼2016-01-05 21:39:57
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