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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提取干植物叶片DNA
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gao189858

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取干植物叶片DNA 已有5人参与

我从干燥的叶片中提取DNA，用的是CTAB法，而且会用氯仿-异戊醇抽提两次，为什么最后的DNA中还可以看到大量的白色沉淀，实在不明白这是为什么？而且在用琼脂糖凝胶检测的时候，条带倒是很亮，就是拖带很厉害，这又是什么原因呢？哪位高人能指点小女子一番啊？跪谢啦！！
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1楼 2014-11-09 15:55:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiantong109

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
糖没除干净，异戊醇多洗几遍。如果还是不行，还可能是你样品量加太多了，我原来也有这个问题，样品量减少试试

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9楼2014-11-10 11:42:36
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普通回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很有可能是糖没除干净

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2楼2014-11-10 09:55:48
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poog502

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
纯化一下就行了，有专门的试剂盒。
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3楼2014-11-10 09:57:29
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-10 16:20:48
大量的白色沉淀, 我觉得是你得到很多的DNA，nanodrop一下。
其实重要的是你要做什么，如果只是PCR能得到基因就行
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2014-11-10 10:50:28
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gao189858

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by drwhoknowss at 2014-11-10 10:50:28
大量的白色沉淀, 我觉得是你得到很多的DNA，nanodrop一下。
其实重要的是你要做什么，如果只是PCR能得到基因就行

嗯，谢谢您的指点，我是要做PCR之用的，至于您说的我得到了很多的DNA，我觉得不太可能，师哥们都说DNA应该是无色透明的那样，但是我提出来的就是纯白的一片。最后弱弱的问一句，nanodrop一下，是怎样啊？
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5楼2014-11-10 11:19:35
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gao189858

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-10 09:55:48
很有可能是糖没除干净

亲，首先很感谢，那依您只见，接下来我应该怎么做呢？或者说在提取的过程中加一些什么样的步骤呢？
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6楼2014-11-10 11:23:51
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by gao189858 at 2014-11-10 11:23:51
亲，首先很感谢，那依您只见，接下来我应该怎么做呢？或者说在提取的过程中加一些什么样的步骤呢？...

常见的就是加盐除糖了，我提RNA的时候就是这么处理的，如果只是要点模板，我一般拿个试剂盒提提就好

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7楼2014-11-10 11:26:38
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by gao189858 at 2014-11-09 15:19:35
嗯，谢谢您的指点，我是要做PCR之用的，至于您说的我得到了很多的DNA，我觉得不太可能，师哥们都说DNA应该是无色透明的那样，但是我提出来的就是纯白的一片。最后弱弱的问一句，nanodrop一下，是怎样啊？...

我自己做过，也指导过很多人提DNA，白色的很常见。没问题。。
nanodrop是测浓度的仪器，你检索一下就知道。PCR有带就行，其他都不太重要
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
8楼2014-11-10 11:28:34
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173734022

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
10楼2014-11-10 13:14:06
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