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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 酶切位点如果形成稳定的a-helix，会不会影响蛋白酶切的效率？
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todd999

木虫 (正式写手)

[交流] 酶切位点如果形成稳定的a-helix，会不会影响蛋白酶切的效率？

酶切位点如果形成稳定的a-helix，会不会影响蛋白酶切的效率？
也就是说酶切位点的二级结构对于酶的效率有无影响？

[ Last edited by silicare on 2014-5-14 at 18:29 ]
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1楼 2012-04-10 12:36:39
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lybio

金虫 (正式写手)
★
todd999(金币+1): 谢谢参与
做了挺多个蛋白，设计同样的蛋白酶切位点，用同一批次的蛋白酶，有的切的很好，有的效率低，有的切不动，有的乱切。乱切可以理解为有些蛋白酶专一性比较差导致，其他的可能是跟蛋白的高级结构有关
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8楼2012-04-25 14:57:57
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zhixuec

木虫 (著名写手)
★
todd999(金币+1): 谢谢参与
有影响 但不会太大的

还是可以切的

相信我~
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2楼2012-04-10 13:17:33
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todd999

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhixuec at 2012-04-10 13:17:33:
有影响 但不会太大的

还是可以切的

相信我~

我看到一篇cell的文章，里面讲有一个linker结构域，文中使用了chymotrypsin和trypsin两种酶来切。已经知道这个linker结构域没有明显的二级结构。最后说了一句话：These sites would not be expected to be accessible to proteases if maintained in a stable helical conformation

这么说来，酶切位点不光是一级结构起作用，二级结构的影响也很大？
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3楼2012-04-10 13:23:51
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junxiao0320

金虫 (小有名气)
★
todd999(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by todd999 at 2012-04-10 13:23:51:
我看到一篇cell的文章，里面讲有一个linker结构域，文中使用了chymotrypsin和trypsin两种酶来切。已经知道这个linker结构域没有明显的二级结构。最后说了一句话：These sites would not be expected to be acces ...

最近连接表达载体，总是切不好，是不是这个原因呢，值得考虑
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4楼2012-04-10 14:15:36
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