应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同一个平板上挑的两个菌测序，序列差很多，大家帮我看看啊，有比对图！谢谢啦
51/1返回列表
查看: 2873  |  回复: 18
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)

[求助] 同一个平板上挑的两个菌测序，序列差很多，大家帮我看看啊，有比对图！谢谢啦

4-3-1和4-3-2是一个菌斑摇菌后分装的两管样品测序结果
4-2-1和4-2-2是同一个平板上另一个菌斑摇菌后分装的两管测序结果
91和92是引物。
四个样品的峰图都没有问题
为什么4-3这组和4-2这组的序列差这么多啊？都是同一批的啊。
第一次碰到这种情况，以前也只是二三个碱基的差异，这次差太多了，什么原因啊？
我们这个没有人做，也没法和别人比对。肿么办？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生物学资料 【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-04-08 13:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+3, Good！ 2012-04-10 18:31:14
有可能是PCR过程特异性不是很好，有非特异条带，但是在电泳时没有分开，挖胶回收时一起挖了，后来被一起连接到载体上。还有可能是片段和载体酶切时间过长，内切酶产生了星活性，把片段和载体切碎了，这样连接转化之后测序会出现很多五花八门的结果。楼主不用纠结，只要有一个是真阳性就行了。一个阳性也没有建议重新做，不用去找具体原因，因为找原因远远比重做要费时间，很多时候导致失败的原因不止一个。
赞一下(3人) 回复此楼
6楼2012-04-09 15:11:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

asdf6074053

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
杩欎箞浣庣殑鐩镐技鎬т竴瀹氭槸鏈夊?囬槼鎬х殑锛屼负浠�涔堜�?鏄窡鐩殑搴?鍒楁瘮瀵瑰憿锛熻�屾槸浠栦滑鐩镐簰姣旓紵鑰屼笖鎴戞劅瑙夊鏋滄寫鍏嬮殕鏃舵病闂鐨勮�?鏄病蹇呰�?灏嗗?曞厠闅嗗垎涓ょ鍐?�?曠嫭娴嬪�?鐨勶紝浣犵殑鏄?屽湪骞虫?夸笂闀夸簡澶氫箙寮�濮嬫寫鐨勶紵
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-04-09 12:42:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asdf6074053

新虫 (初入文坛)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-04-10 18:30:43
不好意思，不知怎么的就乱码了，其实单克隆是没必要分量管单独测序的，除非挑克隆过程就有问题。你是在菌长了多久挑的克隆？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-04-09 12:53:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈年芬芳

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by asdf6074053 at 2012-04-09 12:53:01:
不好意思，不知怎么的就乱码了，其实单克隆是没必要分量管单独测序的，除非挑克隆过程就有问题。你是在菌长了多久挑的克隆？

大概14个小时吧，测两个也是为了有保障，但是为什么两个菌斑的结果差异这么大啊？
赞一下 回复此楼
4楼2012-04-09 13:05:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭