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weizhe34至尊木虫 (职业作家)
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原核表达の不可思议的重组
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各位师兄师姐请帮我分析下:我做一个原核表达目的基因连在T载体上进过英俊公司测序成功,能找到目的片段,接着双酶切连接,酶切为双酶切时间4h,连接16℃过夜,跳单克隆,进过菌落pcr有目的片段的送检,但是检测结果出其意料,尽然为意外一个载体的T载体连接序列。 解释:我做了两个不同载体的原核表达,目的序列一样,只是设计的引物前面酶切和保护碱基不同,在这次重组测序结果出来时我很奇怪的发现,A载体重组的序列尽然为B载体与T载体的序列,这是什么原因?之前A.B载体连在T载体上测序结果都是对的。载体提取的质粒以及酶切都很正常。 |
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panda73
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3楼2012-04-07 11:18:06
weizhe34
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4楼2012-04-07 12:26:17

5楼2012-04-07 13:24:30
mamadexiao
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6楼2012-04-07 21:49:33













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weizhe34