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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » Tris-Tricine SDS PAGE 电泳为何只跑出了marker?
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xifu521

新虫 (初入文坛)

[求助] Tris-Tricine SDS PAGE 电泳为何只跑出了marker?

昨天跑了一个Tris-Tricine SDS PAGE，marker是超低分子量（6个条带），分离胶浓度10%，上样后，开始30V 后来150V跑电泳，考马斯亮蓝染色，结果最后只出来了marker 条带，而且只有前四条，后面分子量4000左右和1016的低分子条带没有跑出来。
我自己分析了原因，可能是分离胶浓度低了，导致marker没有跑出来，但是样品上样量中蛋白质含量符合上样标准，为什么跑不出来呢？还有Marker没有跑全的原因还有别的吗？
谢谢大家看贴，虚心请教！

[ Last edited by xinmor on 2012-5-22 at 11:24 ]
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1楼 2012-04-02 23:08:26
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tuobaohua

荣誉版主 (文坛精英)

投资理财发言人

优秀版主

【答案】应助回帖

★
wenjing120: 金币+1, 华哥加油 2012-04-03 18:04:21
会不会是时间跑久了把Marker给跑出去了？
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xifu521
2楼2012-04-03 08:23:56
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lxmzhj1984

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wenjing120: 金币+1, 鼓励交流！欢迎常来科研版！ 2012-04-03 18:03:55
marker有时候是有问题的，我们实验室也是在公司买的marker，上面画的是10条带，但是最下面的两条带就是跑不出来，这个不用管，只要能确定你的蛋白大小就行了哦
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xifu521
继续拼搏！
3楼2012-04-03 16:02:14
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xifu521

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by tuobaohua at 2012-04-03 08:23:56:
会不会是时间跑久了把Marker给跑出去了？

有这个可能 但是不知道为什么样品没有跑出来
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4楼2012-04-04 20:40:12
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xifu521

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxmzhj1984 at 2012-04-03 16:02:14:
marker有时候是有问题的，我们实验室也是在公司买的marker，上面画的是10条带，但是最下面的两条带就是跑不出来，这个不用管，只要能确定你的蛋白大小就行了哦

哦 谢谢 但是样品没有跑出来 按照要求的蛋白浓度加样了 但是不行呢~
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5楼2012-04-04 20:41:52
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mssj300130

铜虫 (小有名气)
★
tuobaohua: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来科研版！ 2012-04-10 14:59:00
首先你的样品及marker的分子量很小，溴酚蓝大概相当于10+K左右的条带，10%的话首先分辨率就不是太好，而且极其有可能你的marker跑下去了，另外你的样品多大也应该提供一下
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xifu521
6楼2012-04-10 11:44:35
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xifu521

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by mssj300130 at 2012-04-10 11:44:35:
首先你的样品及marker的分子量很小，溴酚蓝大概相当于10+K左右的条带，10%的话首先分辨率就不是太好，而且极其有可能你的marker跑下去了，另外你的样品多大也应该提供一下

谢谢 我又用了16%和20%的分离胶 还是只跑出来了marker... 唉...
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7楼2012-04-10 14:46:31
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mssj300130

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个是纯化产物吗，上样量按照检测结果得出的吗，会不会是杂质影响蛋白检测？
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xifu521
8楼2012-04-10 15:33:05
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mssj300130

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
tuobaohua: 金币+1, 积极应助，欢迎常来科研版！ 2012-04-11 07:29:50
你的marker里有没有预染得，会不会是染色效果不好，尝试下别的染色，银染什么的
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9楼2012-04-10 15:35:49
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xifu521

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by mssj300130 at 2012-04-10 15:35:49:
你的marker里有没有预染得，会不会是染色效果不好，尝试下别的染色，银染什么的

marker 跑得很好，样品不行。
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10楼2012-04-10 18:10:16
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