24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1030  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 链霉菌有没有菌液PCR啊?

我做链霉菌同源重组 要筛到突变株要提很多管DNA 做PCR
我一般用CTAB法提 效果挺好 但是时间长 而且一个人提个20管都要累死了 不知道有没有像大肠杆菌那种直接可以做菌液PCR的
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-03-29 12:18:59:
应该可以。我们做梭菌都是可以的,但条件可能要摸索一下,比如变性时间,退火温度等。总的来说,菌液PCR要难做一点。

之前是不是需要用溶菌酶之类的处理一下 再用沸水煮一下啊
3楼2012-03-29 13:09:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

gywyl1977

木虫 (正式写手)

应该可以。我们做梭菌都是可以的,但条件可能要摸索一下,比如变性时间,退火温度等。总的来说,菌液PCR要难做一点。
2楼2012-03-29 12:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gywyl1977

木虫 (正式写手)

菌液离心收集后洗一下就可以了,然后用buffer悬浮。PCR时菌只要极少量就可以,可以做几个梯度。DNA聚合酶也需要多试几种,不同的酶效果可能不一样。
4楼2012-03-29 16:26:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-03-29 16:26:11:
菌液离心收集后洗一下就可以了,然后用buffer悬浮。PCR时菌只要极少量就可以,可以做几个梯度。DNA聚合酶也需要多试几种,不同的酶效果可能不一样。

用什么buffer悬浮啊?还有我这个链霉菌菌体很粘稠 所以如果不做其他处理菌体会悬浮不起来的 会成块 还打不散
5楼2012-03-29 16:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +19 不逢春 2026-04-05 20/1000 2026-04-10 10:15 by may_新宇
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +16 努力奋斗112 2026-04-06 18/900 2026-04-10 10:06 by may_新宇
[考研] 考研二轮调剂 +8 故人?? 2026-04-09 8/400 2026-04-10 09:44 by 青梅duoduo
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+11 化工人999 2026-04-09 42/2100 2026-04-10 09:42 by 690616278
[考研] 中科院总分315求调剂 +4 lallalh 2026-04-09 4/200 2026-04-10 09:41 by 690616278
[考研] 314求调剂 +21 wakeluofu 2026-04-09 22/1100 2026-04-10 07:51 by 1753564080
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +5 白云123456789 2026-04-09 7/350 2026-04-09 21:03 by 白云123456789
[考研] 电子信息270求调剂 +11 terminal469 2026-04-07 11/550 2026-04-09 18:28 by hy861222
[考研] 材料295 +15 小英11 2026-04-03 16/800 2026-04-09 15:44 by only周
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 求考研材料调剂 +3 材化李可 2026-04-07 3/150 2026-04-08 00:21 by JourneyLucky
[考研] 305求调剂 +4 77Qi 2026-04-06 4/200 2026-04-07 20:06 by shanqishi
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 0705理学294求调剂 +3 成果成果cg5 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:04 by simons1972
信息提示
请填处理意见