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紫菱Kitty

金虫 (小有名气)

[交流] PCR回收产物放了两天之后再做连接有问题吗? 已有13人参与

非高保真r-Taq酶P了一个基因片段,PCR体系结束后没有及时跑胶回收,一直放在4℃冰箱,两天之后又回收的,这样再用于T载体连接有问题吗?
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题不大,仔细纯化下。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2012-03-28 10:31:11
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tianliangtao

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为啥不放到-20度呢?我们一般都是如果来不及就先切下来放到-20度冻着的,你也只有一试了
3楼2012-03-28 10:34:20
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cao_ming

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没有问题,LZ常规做吧。。。
4楼2012-03-28 14:01:17
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
回收回来后看看电泳条带是否清楚,如果目的条带清楚就没有问题,如果是模糊的建议就重新做吧。
相信自己,一定能成功!
5楼2012-03-28 14:10:45
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该问题不大,但是建议以后几天的情况置于-20,4度只有几个小时的时候可以
6楼2012-03-28 15:51:10
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aoaoshch

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
连T载体效率高而且方便,可以试试。最好放-20啊,不然会降解的。我的PCR产物放4度才两天,就弥散得找不到条带了。不行的话,只好重P了……
7楼2012-03-28 18:08:35
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wjgang728

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
4℃放两天理论上没问题,但是不排除又少部分降解,可能没有预期效果好,楼主试试吧。
我相信大家,希望多多指点。谢谢!
8楼2012-03-29 09:55:49
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hmily890404

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该是木有什么大问题~~DNA降解不会那么快的~~~
9楼2012-03-29 19:19:35
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
莫有问题啦 反正都放了 楼主别担心 继续做。。。。DNA很难降解的,。。。。
10楼2012-03-29 19:47:57
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