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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR回收产物放了两天之后再做连接有问题吗？
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紫菱Kitty

金虫 (小有名气)

[交流] PCR回收产物放了两天之后再做连接有问题吗？ 已有13人参与

非高保真r-Taq酶P了一个基因片段，PCR体系结束后没有及时跑胶回收，一直放在4℃冰箱，两天之后又回收的，这样再用于T载体连接有问题吗？
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梦随风万里，几度洪辰来去。人面桃花长相忆。又是一年春华成秋碧，莫叹明月笑多情。
1楼 2012-03-28 09:58:40
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
问题不大，仔细纯化下。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2012-03-28 10:31:11
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tianliangtao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为啥不放到-20度呢？我们一般都是如果来不及就先切下来放到-20度冻着的，你也只有一试了
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3楼2012-03-28 10:34:20
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cao_ming

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没有问题，LZ常规做吧。。。
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4楼2012-03-28 14:01:17
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
回收回来后看看电泳条带是否清楚，如果目的条带清楚就没有问题，如果是模糊的建议就重新做吧。
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相信自己，一定能成功！
5楼2012-03-28 14:10:45
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该问题不大，但是建议以后几天的情况置于-20,4度只有几个小时的时候可以
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6楼2012-03-28 15:51:10
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
连T载体效率高而且方便，可以试试。最好放-20啊，不然会降解的。我的PCR产物放4度才两天，就弥散得找不到条带了。不行的话，只好重P了……
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7楼2012-03-28 18:08:35
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wjgang728

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
4℃放两天理论上没问题，但是不排除又少部分降解，可能没有预期效果好，楼主试试吧。
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我相信大家，希望多多指点。谢谢！
8楼2012-03-29 09:55:49
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hmily890404

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是木有什么大问题~~DNA降解不会那么快的~~~
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9楼2012-03-29 19:19:35
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我爱沈泉

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
莫有问题啦 反正都放了 楼主别担心 继续做。。。。DNA很难降解的，。。。。
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10楼2012-03-29 19:47:57
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