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fangni

新虫 (正式写手)

[求助] 菌液PCR求助

我做了菌液PCR,一切都很正常,挑菌的时候先在10微升的灭菌超纯水中过一下,完了摇的菌,从10微升中取2微升进行PCR,条带很好,无杂带,送去测序却没有结果,说是没有摇出来,想请教高手这是怎么回事?
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fangni: 金币+1, 有帮助 2012-03-27 10:20:51
可能阳性菌没张起来或含量较低
PCR是一个放大实验,验证不是很准,最好是提了质粒,单双酶切鉴定了的

我以前图板子,挑克隆,难免稍挂点克隆周围的空白琼脂(图的转化的连接产物),可能会引进去未连上的目的片段,所以有些克隆P就是阳性的,但酶切鉴定是阴性的(不少呢)。

[ Last edited by telomerase on 2012-3-26 at 16:16 ]
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-03-26 16:14:15
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fangni

新虫 (正式写手)

谢谢,我再看看
3楼2012-03-27 10:20:36
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