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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fangni

新虫 (正式写手)

[求助] 菌液PCR求助

我做了菌液PCR，一切都很正常，挑菌的时候先在10微升的灭菌超纯水中过一下，完了摇的菌，从10微升中取2微升进行PCR，条带很好，无杂带，送去测序却没有结果，说是没有摇出来，想请教高手这是怎么回事？
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1楼 2012-03-26 15:42:58
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fangni: 金币+1, ★有帮助 2012-03-27 10:20:51
可能阳性菌没张起来或含量较低
PCR是一个放大实验，验证不是很准，最好是提了质粒，单双酶切鉴定了的

我以前图板子，挑克隆，难免稍挂点克隆周围的空白琼脂（图的转化的连接产物），可能会引进去未连上的目的片段，所以有些克隆P就是阳性的，但酶切鉴定是阴性的（不少呢）。

[ Last edited by telomerase on 2012-3-26 at 16:16 ]
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-03-26 16:14:15
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fangni

新虫 (正式写手)
谢谢，我再看看
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3楼2012-03-27 10:20:36
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