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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于xba I单酶切后的TA连接
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Zedone

木虫 (正式写手)

[交流] 关于xba I单酶切后的TA连接

由于Xba I酶切后会产生T端，本人最近用Xba I对质粒载体进行单酶切，然后再将目的片段通过与其进行TA连接。在整个过程中，从酶切，胶回收，每一步都做了验证。最后用takara T4 ligase进行16°C过夜连接反应。最终转化后却没有得到转化子。现已验证感受态没有问题。请问有出现过问题的虫友么？此外，在连接时，我另外尝试4°C连接，均未果。
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1楼2012-03-06 20:00:37
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Zedone

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by Petter_JDW at 2012-03-06 21:05:56:
补充~下面应该是3-NN  ANN-5~~所以即使有也不能连上的~~~~

原来是这样啊。我当时是真的没仔细看xbaI。谢谢你。
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8楼2012-03-08 18:57:00
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