| 查看: 1337 | 回复: 3 | ||
zxd95至尊木虫 (著名写手)
|
[求助]
单酶切连接注意事项及洋葱表皮转化试验
|
|
最近准备做蛋白质定位观察和BiFC验证蛋白互作，所使用的载体为pSCYNE和pSCYCE（Waters 2004），其中一个基因（750bp）由于酶切位点限制，只能使用SalI单切，但是做了一次没有成功，请教虫友关于但酶切连接的注意事项。 此外，载体做好后，是要做EYFP的BiFC，准备转化洋葱表皮，由于没有这方面的经验，请虫友们提供一些参考资料或亲身的实验经验。 最后，是我去年8月做了35S:MYB-EYFP和35S:WD40-EYFP的转基因烟草，到现在几代5次了，不知道还能不能看到荧光，RT-PCR是可以检测到的。因为烟草叶片厚，怎样观察才好呢？有没有虫友做过？ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有66人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 单酶切连接的问题
已经有4人回复
- DNA双酶切后在两端加adapter的连接问题
已经有7人回复
- 连接酶切问题
已经有10人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 为什么我做的酶切连接总是不长斑呢？
已经有24人回复
- 【分享】分子克隆实验专题-（二）酶切连接要点探讨
已经有15人回复
- 【求助/交流】关于酶切产物连接的一点问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】为什么pUC18和DNA片段经过Eco1和Hind3酶切后无法连接
已经有3人回复
- 【求助/交流】pcr,酶切，连接，哪步可以省？
已经有13人回复
- 【求助/交流】单酶切连接的克隆急……
已经有10人回复
liuyu_sdili
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3045.9
- 散金: 15
- 红花: 2
- 帖子: 394
- 在线: 311.7小时
- 虫号: 1130112
- 注册: 2010-10-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2012-03-06 09:18:45
zxd95
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 19353.2
- 散金: 181
- 红花: 7
- 帖子: 2386
- 在线: 282.8小时
- 虫号: 488216
- 注册: 2007-12-29
- 性别: GG
- 专业: 无机非金属材料
3楼2012-03-06 10:54:19
sarah-miao
银虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 184.6
- 散金: 116
- 红花: 2
- 帖子: 753
- 在线: 154.4小时
- 虫号: 1462411
- 注册: 2011-10-26
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
4楼2013-05-30 16:02:03
