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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

看天(BioEPI+1): 感谢热心交流 2012-03-09 16:21:24
引用回帖:
14楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-03-09 03:05:13:
我自己都找不到了,就在这里说吧,

注意下面图片左上角的注释,cond=电导,cond%=电导率,这两个是表示盐的,A280是用于测定蛋白质的。每两条竖直的红线是每一次脱盐洗脱的循环,那一次我一共做了很多次,用的是AKTA纯化仪,层析柱是GE的desalting,26/10,流速快10ml/min。

我用的样品是真菌固体培养物用超纯水浸泡,离心得到的粗酶液脱盐。从A280曲线来看,盐峰之后再次升高,说明粗酶液里也有很多分子量比蛋白质小的能引起A280吸收的物质。由于A280的原理是测定分子结构中有共轭双键构成大Ω键的物质,所以某些存在此结构的色素也能引起光吸收,而这部分洗脱液确实是有颜色的,所以可能是分子量较小的色素和其它非蛋白质的小分子物质,而不是蛋白质。因为脱盐柱是分子筛,分子尺寸大的蛋白质应该在盐之前就被洗脱出来,存在于第一个峰中。(怎么说我的图是广告呢,再发一次又能发上来的怎么可能是嘛)





流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
15楼2012-03-09 03:14:19
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