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冼亮淀粉酶

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生物大分子降解酶

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【答案】应助回帖

看天(BioEPI+1): 感谢热心交流 2012-03-09 16:21:24

引用回帖:

14楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-03-09 03:05:13:
我自己都找不到了，就在这里说吧，

注意下面图片左上角的注释，cond=电导，cond%=电导率，这两个是表示盐的，A280是用于测定蛋白质的。每两条竖直的红线是每一次脱盐洗脱的循环，那一次我一共做了很多次，用的是AKTA纯化仪，层析柱是GE的desalting，26/10，流速快10ml/min。

我用的样品是真菌固体培养物用超纯水浸泡，离心得到的粗酶液脱盐。从A280曲线来看，盐峰之后再次升高，说明粗酶液里也有很多分子量比蛋白质小的能引起A280吸收的物质。由于A280的原理是测定分子结构中有共轭双键构成大Ω键的物质，所以某些存在此结构的色素也能引起光吸收，而这部分洗脱液确实是有颜色的，所以可能是分子量较小的色素和其它非蛋白质的小分子物质，而不是蛋白质。因为脱盐柱是分子筛，分子尺寸大的蛋白质应该在盐之前就被洗脱出来，存在于第一个峰中。(怎么说我的图是广告呢，再发一次又能发上来的怎么可能是嘛)