24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3758  |  回复: 18

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+3): 鼓励 2012-03-02 21:27:46
目的蛋白要比预测的小4kD左右(目的条带约55kD)如果SDS-PAGE结果的话也不能说明真的小,SDS-PAGE出来的只是表观分子量,不是真实分子量。如果不符,可以利用质谱、凝胶排阻等确认。
2楼2012-03-01 19:47:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-03-01 20:52:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励讨论 2012-03-02 21:28:07
zzjzheng(金币+2): 2012-03-03 16:06:23
引用回帖:
3楼: Originally posted by zzjzheng at 2012-03-01 20:52:57:
这个质谱是不是跟分析化合物质谱差不多啊?凝胶排阻需要哪些东西啊?我们这条件有限,以前师兄师姐都不怎么做分子,所以对这方面了解较少……

有点不一样,是飞行质谱。
质谱和凝胶排阻都要蛋白纯化后做,凝胶排阻就是凝胶过滤,需要一些已知分子量的蛋白做为标准。
4楼2012-03-01 21:07:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuijy

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
楼主的那个预测蛋白分子量是怎么预测啊
5楼2012-03-02 21:24:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

6楼2012-03-03 12:16:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-03-03 12:19:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by zzjzheng at 2012-03-03 12:19:24:
这位仁兄,你看电泳跑出的结果跟网上预测结果相差4kD~5kD,这属于正常范围吗???

正常,但最好别的方法验证下。
8楼2012-03-03 13:51:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

9楼2012-03-03 16:05:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouzejun202

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
诱导表达后马上跑电泳。
10楼2012-03-03 16:30:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

11楼2012-03-03 18:11:19
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzjzheng

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

12楼2012-03-03 19:59:25
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by zzjzheng at 2012-03-03 19:59:25:
兄台,你看我这个分析的对不对,我的上样缓冲液里没有加β-巯基乙醇,但是目的蛋白氨基酸序列里含有半胱氨酸,是不是会形成二硫键使目的蛋白没有完全打开,最终导致跑出来的条带偏小???

如果是分子间形成二硫键,形成二聚体或多聚体,分子量会偏大;如果是分子内形成二硫键,分子量不变。
13楼2012-03-03 20:27:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a731705125

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-03 20:27:57:
如果是分子间形成二硫键,形成二聚体或多聚体,分子量会偏大;如果是分子内形成二硫键,分子量不变。

学习了,不过分子形状对分子量大小也有影响吧,分子内形成二硫键应该体积变小,是不是分子量要相对小些?
14楼2012-03-03 20:58:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by a731705125 at 2012-03-03 20:58:46:
学习了,不过分子形状对分子量大小也有影响吧,分子内形成二硫键应该体积变小,是不是分子量要相对小些?

对,所以最好验证下。
15楼2012-03-03 23:05:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jathan

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看虫友们回帖,长了不少知识啊~
16楼2013-03-27 16:48:49
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxiang29

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我最近也出现了这种问题,请问楼主现在找到原因了么
17楼2013-05-06 21:52:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuahan

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你好,正在做原核表达,想请问一下表达载体应该怎么选择尼?后期是要用纯化目的蛋白做抗体的,pET-22,pET-28,pET-30,我应该怎么选择尼?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
18楼2014-04-30 19:43:27
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zbblpp

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最近做表达,也出现了这个问题。蛋白一部分上清表达,一部分包涵体,上清为20KD,包涵体尿素溶解后只有14.用的PET28A载体,测序没有问题,实在不知道什么原因了
19楼2014-08-01 23:20:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zzjzheng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 311求调剂 +9 xyp想读书 2026-04-10 10/500 2026-04-10 11:34 by 高维春
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +16 ioodiiij 2026-04-08 16/800 2026-04-09 23:08 by wolf97
[考研] 一志愿211电子信息347求调剂 +3 554916 2026-04-03 4/200 2026-04-09 22:24 by 554916
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-05 15/750 2026-04-09 13:36 by 故人??
[考研] 086000生物与医药调剂 +7 awwwwwooooo 2026-04-09 7/350 2026-04-09 13:31 by 北极159263
[考研] 285求调剂 +20 哦呦呼o 2026-04-04 20/1000 2026-04-08 22:23 by yutian743
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学!!6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 22408 266求调剂 +11 masss11222 2026-04-07 14/700 2026-04-08 11:06 by yulian1987
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 346分的生物与医药08600求调剂 +6 常雨阳上岸 2026-04-05 7/350 2026-04-06 12:36 by lys0704
[考研] 工科求调剂 +15 11ggg 2026-04-03 15/750 2026-04-05 16:24 by zzx2138
[考研] 考研生物学考A区211,初试322,科目生化和生物综合,求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
信息提示
请填处理意见