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原核表达 PET-30载体 目的蛋白分子量偏小?
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zzjzheng
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2012-03-01 19:32:26
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lxj341401
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7楼
:
Originally posted by
zzjzheng
at 2012-03-03 12:19:24:
这位仁兄,你看电泳跑出的结果跟网上预测结果相差4kD~5kD,这属于正常范围吗???
正常,但最好别的方法验证下。
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8楼
2012-03-03 13:51:47
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lxj341401
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1949stone(金币+3): 鼓励 2012-03-02 21:27:46
目的蛋白要比预测的小4kD左右(目的条带约55kD)如果SDS-PAGE结果的话也不能说明真的小,SDS-PAGE出来的只是表观分子量,不是真实分子量。如果不符,可以利用质谱、凝胶排阻等确认。
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2楼
2012-03-01 19:47:37
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zzjzheng
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3楼
2012-03-01 20:52:57
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zzjzheng(金币+2): 2012-03-03 16:06:23
引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
zzjzheng
at 2012-03-01 20:52:57:
这个质谱是不是跟分析化合物质谱差不多啊?凝胶排阻需要哪些东西啊?我们这条件有限,以前师兄师姐都不怎么做分子,所以对这方面了解较少……
有点不一样,是飞行质谱。
质谱和凝胶排阻都要蛋白纯化后做,凝胶排阻就是凝胶过滤,需要一些已知分子量的蛋白做为标准。
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4楼
2012-03-01 21:07:43
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