| 查看: 4541 | 回复: 16 | |||
[交流]
overlap PCR之问题
|
| 各位，我最近在连基因A（700bp左右）和基因B（700bp左右），重叠的连个引物为48bp，连个基因各占24bp。当做重叠PCR时，在1400bp处有条带（在我用的marker-D 1000bp和2000bp间的条带）当然也有其他的杂带。我将此1400bp的带回收后，以此为模板，用头尾引物扩增，每次都是1400bp处条带很暗，而在700bp处条带很亮。我用回收的1400bp做模板时，分别扩基因A和基因B却又能扩出来很明显的A和B，这不是证明了我回收的1400bp为连接上的基因吗 ，可为什么用头尾引物扩1400本身却扩不出来呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有182人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于融合PCR的问题
已经有14人回复
- overlap PCR做不出来呐。。。。
已经有23人回复
- 帮人代做克隆有可行性吗？
已经有28人回复
- 做过overlap PCR的虫子过来看看
已经有19人回复
- A noob intersted in SCI searching for help(about overlap PCR)
已经有4人回复
- 构建全长cDNA中连接的问题
已经有14人回复
- 两个基因融合不起来
已经有13人回复
- 【求助/交流】PCR问题求助
已经有27人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
科瑞赛生物内皮细胞培养基试用装限时大放送，助力你的实验高效进阶！
+1/84
-
上海师范大学生物医用材料方向招收2026级博士研究生
+1/83
-
湖南师范大学医工交叉科研团队招收计算机博士生
+1/80
-
中国石油大学（华东）电气工程专业博士研究生招生
+1/79
-
南京理工大学曾海波/李伟金 招聘博士后（电磁响应：介电调控等方向）
+1/79
-
上海大学昝鹏教授、军事医学研究院伯晓晨研究员/倪铭副研究员 课题组招聘博士生
+1/77
-
山东征女友，坐标济南
+1/58
-
限广州，征女友
+2/58
-
昆明理工大学冶能院离子液体冶金课题组招收博士
+1/57
-
坐标济南，山东农科院招 有机合成 or 药物化学 联培硕士研究生
+1/37
-
中国科学院大连化学物理研究所DNL0902研究组招聘博士后和职工
+1/31
-
深圳信息职业技术大学-博后招聘（优秀可留校）
+1/31
-
厦门大学航空航天学院智能制造课题组招2026年申请审核制博士生1-2名
+1/30
-
征女友 @长安
+1/21
-
SCI，计算机相关可以写
+1/21
-
福建师范大学柔性电子学院招收2026年博士（储能材料与柔性电子器件）
+2/14
-
2026年黄河科技学院纳米功能材料研究所招聘
+2/8
-
博士/硕士招生
+1/7
-
上海交通大学环境学院（环境化学与环境毒理学；大数据与人工智能）博士后招聘～
+1/6
-
北京工业大学材料学院吴玉锋教授、王长龙研究员招收博士研究生
+1/3
|
1 ATGGTCAGCT ACTGGGACAC CGGGGTCCTG CTGTGCGCGC TGCTCAGCTG TCTGCTTCTC ACAGGATCTA GTTCAGGTAG TGATACAGGT AGACCTTTCG TACCAGTCGA TGACCCTGTG GCCCCAGGAC GACACGCGCG ACGAGTCGAC AGACGAAGAG TGTCCTAGAT CAAGTCCATC ACTATGTCCA TCTGGAAAGC 101 TAGAGATGTA CAGTGAAATC CCCGAAATTA TACACATGAC TGAAGGAAGG GAGCTCGTCA TTCCCTGCCG GGTTACGTCA CCTAACATCA CTGTTACTTT ATCTCTACAT GTCACTTTAG GGGCTTTAAT ATGTGTACTG ACTTCCTTCC CTCGAGCAGT AAGGGACGGC CCAATGCAGT GGATTGTAGT GACAATGAAA 201 AAAAAAGTTT CCACTTGACA CTTTGATCCC TGATGGAAAA CGCATAATCT GGGACAGTAG AAAGGGCTTC ATCATATCAA ATGCAACGTA CAAAGAAATA TTTTTTCAAA GGTGAACTGT GAAACTAGGG ACTACCTTTT GCGTATTAGA CCCTGTCATC TTTCCCGAAG TAGTATAGTT TACGTTGCAT GTTTCTTTAT 301 GGGCTTCTGA CCTGTGAAGC AACAGTCAAT GGGCATTTGT ATAAGACAAA CTATCTCACA CATCGACAAA CCAATACAAT CATAGATGTG GTTCTGAGTC CCCGAAGACT GGACACTTCG TTGTCAGTTA CCCGTAAACA TATTCTGTTT GATAGAGTGT GTAGCTGTTT GGTTATGTTA GTATCTACAC CAAGACTCAG 401 CGTCTCATGG AATTGAACTA TCTGTTGGAG AAAAGCTTGT CTTAAATTGT ACAGCAAGAA CTGAACTAAA TGTGGGGATT GACTTCAACT GGGAATACCC GCAGAGTACC TTAACTTGAT AGACAACCTC TTTTCGAACA GAATTTAACA TGTCGTTCTT GACTTGATTT ACACCCCTAA CTGAAGTTGA CCCTTATGGG 501 TTCTTCGAAG CATCAGCATA AGAAACTTGT AAACCGAGAC CTAAAAACCC AGTCTGGGAG TGAGATGAAG AAATTTTTGA GCACCTTAAC TATAGATGGT AAGAAGCTTC GTAGTCGTAT TCTTTGAACA TTTGGCTCTG GATTTTTGGG TCAGACCCTC ACTCTACTTC TTTAAAAACT CGTGGAATTG ATATCTACCA 601 GTAACCCGGA GTGACCAAGG ATTGTACACC TGTGCAGCAT CCAGTGGGCT GATGACCAAG AAGAACAGCA CATTTGTCAG GGTCCATGAA AAA CATTGGGCCT CACTGGTTCC TAACATGTGG ACACGTCGTA GGTCACCCGA CTACTGGTTC TTCTTGTCGT GTAAACAGTC CCAGGTACTT TTT 基因A 1 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCACCTGAAC TCCTGGGGGG ACCGTCAGTC TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CTGTTTTGAG TGTGTACGGG TGGCACGGGT CGTGGACTTG AGGACCCCCC TGGCAGTCAG AAGGAGAAGG GGGGTTTTGG GTTCCTGTGG GAGTACTAGA 101 CCCGGACCCC TGAGGTCACA TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC GGCGTGGAGG TGCATAATGC GGGCCTGGGG ACTCCAGTGT ACGCACCACC ACCTGCACTC GGTGCTTCTG GGACTCCAGT TCAAGTTGAC CATGCACCTG CCGCACCTCC ACGTATTACG 201 CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG GTTCTGTTTC GGCGCCCTCC TCGTCATGTT GTCGTGCATG GCACACCAGT CGCAGGAGTG GCAGGACGTG GTCCTGACCG ACTTACCGTT CCTCATGTTC 301 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT ACGTTCCAGA GGTTGTTTCG GGAGGGTCGG GGGTAGCTCT TTTGGTAGAG GTTTCGGTTT CCCGTCGGGG CTCTTGGTGT CCACATGTGG GACGGGGGTA 401 CCCGGGATGA GCTGACCAAG AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGGCCCTACT CGACTGGTTC TTGGTCCAGT CGGACTGGAC GGACCAGTTT CCGAAGATAG GGTCGCTGTA GCGGCACCTC ACCCTCTCGT TACCCGTCGG 501 GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GCTGGACTCC GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG CCTCTTGTTG ATGTTCTGGT GCGGAGGGCA CGACCTGAGG CTGCCGAGGA AGAAGGAGAT GTCGTTCGAG TGGCACCTGT TCTCGTCCAC CGTCGTCCCC 601 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA ATGA TTGCAGAAGA GTACGAGGCA CTACGTACTC CGAGACGTGT TGGTGATGTG CGTCTTCTCG GAGAGGGACA GAGGCCCATT TACT 基因B P1：5'GCTCTAGAATGGTCAGCTACTGGGACAC3' P2：5'GGTGGGCATGTGTGAGTTTTGTCTTTTTCATGGACCCTGACAAATGTG3' P3：5'CACATTTGTCAGGGTCCATGAAAAAGACAAAACTCACACATGCCCACC3' p4:5'GAGAATTCTCATTTACCCGGAGACAGGG3' |
2楼2012-02-27 19:56:30
3楼2012-02-27 19:57:18
4楼2012-02-28 09:14:14
5楼2012-02-28 09:29:01
6楼2012-02-28 09:32:06
7楼2012-02-28 09:50:31
8楼2012-02-28 09:51:44
9楼2012-02-28 09:52:52
10楼2012-02-28 15:18:46
11楼2012-02-28 15:46:40
12楼2012-02-28 16:04:05
13楼2012-02-28 18:52:34
14楼2012-02-28 20:11:04
15楼2012-02-29 06:53:42
16楼2012-02-29 09:09:02
17楼2012-02-29 20:32:06