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overlap PCR之问题
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| 各位,我最近在连基因A(700bp左右)和基因B(700bp左右),重叠的连个引物为48bp,连个基因各占24bp。当做重叠PCR时,在1400bp处有条带(在我用的marker-D 1000bp和2000bp间的条带)当然也有其他的杂带。我将此1400bp的带回收后,以此为模板,用头尾引物扩增,每次都是1400bp处条带很暗,而在700bp处条带很亮。我用回收的1400bp做模板时,分别扩基因A和基因B却又能扩出来很明显的A和B,这不是证明了我回收的1400bp为连接上的基因吗 ,可为什么用头尾引物扩1400本身却扩不出来呢? |
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14楼2012-02-28 20:11:04
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