应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » overlap PCR之问题
21/1返回列表
查看: 4531  |  回复: 16
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tyw2623

金虫 (小有名气)

[交流] overlap PCR之问题

各位，我最近在连基因A（700bp左右）和基因B（700bp左右），重叠的连个引物为48bp，连个基因各占24bp。当做重叠PCR时，在1400bp处有条带（在我用的marker-D 1000bp和2000bp间的条带）当然也有其他的杂带。我将此1400bp的带回收后，以此为模板，用头尾引物扩增，每次都是1400bp处条带很暗，而在700bp处条带很亮。我用回收的1400bp做模板时，分别扩基因A和基因B却又能扩出来很明显的A和B，这不是证明了我回收的1400bp为连接上的基因吗  ，可为什么用头尾引物扩1400本身却扩不出来呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-02-27 19:52:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkl1984

金虫 (小有名气)
★
tyw2623(金币+1):谢谢参与
你看一下，你的外侧引物有引物二聚体，截断引物大约在18-21碱基。
赞一下 回复此楼
12楼2012-02-28 16:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tyw2623 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭