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冰凝东金虫 (小有名气)
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[求助]
双酶切（Kpn1/BamH1）T-Simple载体，没有得到目的条带……
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将目的基因连接到了pMD18-T-Simple载体上，挑单克隆提取了质粒，目的基因的酶切位点是Kpn1和BamH1，今日对所提质粒进行双酶切，所用酶是TaKaRa的，体系如下：10×K Buffer 1μ， 质粒 15μ， Kpn1 1μ， BamH1 1μ， ddH2O 2μ 37℃双酶切过夜，凝胶检测没有目的条带……目的条带750bp。年前同样体系双酶切其他基因没有问题！！ 小弟新人，金币不多，希望能得到建设性意见…… |
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冰凝东
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