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冰凝东金虫 (小有名气)
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双酶切(Kpn1/BamH1)T-Simple载体,没有得到目的条带……
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将目的基因连接到了pMD18-T-Simple载体上,挑单克隆提取了质粒,目的基因的酶切位点是Kpn1和BamH1,今日对所提质粒进行双酶切,所用酶是TaKaRa的,体系如下:10×K Buffer 1μ, 质粒 15μ, Kpn1 1μ, BamH1 1μ, ddH2O 2μ 37℃双酶切过夜,凝胶检测没有目的条带……目的条带750bp。年前同样体系双酶切其他基因没有问题!! 小弟新人,金币不多,希望能得到建设性意见…… |
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2楼2012-02-18 15:01:46
冰凝东
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