| 查看: 1960 | 回复: 2 | ||
冰凝东金虫 (小有名气)
|
[求助]
双酶切（Kpn1/BamH1）T-Simple载体，没有得到目的条带……
|
|
将目的基因连接到了pMD18-T-Simple载体上，挑单克隆提取了质粒，目的基因的酶切位点是Kpn1和BamH1，今日对所提质粒进行双酶切，所用酶是TaKaRa的，体系如下：10×K Buffer 1μ， 质粒 15μ， Kpn1 1μ， BamH1 1μ， ddH2O 2μ 37℃双酶切过夜，凝胶检测没有目的条带……目的条带750bp。年前同样体系双酶切其他基因没有问题！！ 小弟新人，金币不多，希望能得到建设性意见…… |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有151人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有14人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切问题
已经有15人回复
- 求助 双酶切验证阳性克隆的问题
已经有12人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 为什么连接这么难呢？
已经有54人回复
- 双酶切没出现目的条带，呈弥散型，有图，求助。
已经有7人回复
- 【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体
已经有26人回复
- 双酶切后目的条带下出现多个条带的原因
已经有9人回复
- 【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
imyting
至尊木虫 (正式写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 66 (初中生)
- 金币: 10218.2
- 散金: 658
- 红花: 5
- 帖子: 805
- 在线: 167.6小时
- 虫号: 736362
- 注册: 2009-03-31
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2012-02-18 15:01:46
冰凝东
金虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1162.7
- 散金: 223
- 红花: 4
- 帖子: 299
- 在线: 67.9小时
- 虫号: 1550921
- 注册: 2011-12-25
- 性别: GG
- 专业: 植物生殖生物学
3楼2012-02-19 16:39:20
