| 查看: 2037 | 回复: 2 | ||
冰凝东金虫 (小有名气)
|
[求助]
双酶切(Kpn1/BamH1)T-Simple载体,没有得到目的条带……
|
|
将目的基因连接到了pMD18-T-Simple载体上,挑单克隆提取了质粒,目的基因的酶切位点是Kpn1和BamH1,今日对所提质粒进行双酶切,所用酶是TaKaRa的,体系如下:10×K Buffer 1μ, 质粒 15μ, Kpn1 1μ, BamH1 1μ, ddH2O 2μ 37℃双酶切过夜,凝胶检测没有目的条带……目的条带750bp。年前同样体系双酶切其他基因没有问题!! 小弟新人,金币不多,希望能得到建设性意见…… |
» 猜你喜欢
卟啉家族中的明星分子:MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
宠物寄生虫防治:氟雷拉纳阻断GABA受体,持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有125人回复
为呼吸打开通道:依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
Dordaviprone(ONC201):小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
依喜替康:新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
膀胱癌靶向治疗新选择:厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
从水母到实验室:腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
线粒体氧化磷酸化的新靶点:S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
PROTAC药物开发选择VHL配体:MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
MCC950:NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:
双酶切问题
已经有15人回复
求助 双酶切验证阳性克隆的问题
已经有12人回复
双酶切连接表达载体,两个月都没做出来,问题到底出在哪里呢~?求指点
已经有52人回复
为什么连接这么难呢?
已经有54人回复
双酶切没出现目的条带,呈弥散型,有图,求助。
已经有7人回复
【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体
已经有26人回复
双酶切后目的条带下出现多个条带的原因
已经有9人回复
【求助/交流】双酶切质粒后,目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
imyting
至尊木虫 (正式写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 66 (初中生)
- 金币: 10539.7
- 散金: 658
- 红花: 5
- 帖子: 806
- 在线: 168.1小时
- 虫号: 736362
- 注册: 2009-03-31
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能

2楼2012-02-18 15:01:46
冰凝东
金虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1162.7
- 散金: 223
- 红花: 4
- 帖子: 299
- 在线: 67.9小时
- 虫号: 1550921
- 注册: 2011-12-25
- 性别: GG
- 专业: 植物生殖生物学
3楼2012-02-19 16:39:20












回复此楼