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SDS-PAGE与蛋白质内部共价健的关系
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xinshi
银虫
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专业: 生物海洋学与海洋生物资源
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求助
]
SDS-PAGE与蛋白质内部共价健的关系
请教一个问题,我有一个蛋白,含有二硫键的,用分析柱分析结果,聚体占70%,单体占30%,但是跑非还原的SDS-PAGE,结果聚体占60%,单体占40%。是不是能说明蛋白质聚体里面10%是非二硫键(比如可能是氢键)结合的,跑电泳的时候被打断了,转化成单体了???还是说蛋白内部还有非共价结合的???SDS-PAGE能反映蛋白内部结合的情况吗???
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1楼
2012-02-03 14:53:57
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yili_90
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【答案】应助回帖
SDS 是sodium dodecyl sulfide.可以使蛋白质活,也就是将较大的蛋白质分开成若干亚基。他只作用于亚基之间的二硫键。第一个作用是使得亚基表面带负电,从而保证了电泳时,所有亚基都会向正极移动。第二个作用是使不带电的亚基或多肽带电,使得他能够根据自身质量不同而向正极移动不同距离
PAGE是polyacrylamide gel electrophoresis.是根据蛋白质大小不同而分离蛋白质的
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plummet
7楼
2013-05-14 13:58:43
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lcppp1974
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专业: 生化分析及生物传感
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2012-02-03 20:34:51
60%和70%是非常接近的,故不能作为差来看!而且氢键不是共价键,所以不用考虑。你说的转化为单体,一般情况下是不会的。建议你跑尿素PAGE,4 M的尿素可以打断氢键
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2楼
2012-02-03 16:23:39
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银虫
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性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
这个在误差以内,非还原SDS-PAGE 没有还原剂,不能打开二硫键
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3楼
2012-02-03 16:55:41
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巫圣逸
铁虫
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虫号: 1459440
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专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
刚刚开始研究这一切好陌生啊!!!!!!!
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不以物喜,不以己悲
4楼
2012-02-04 21:27:36
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