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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE与蛋白质内部共价健的关系
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xinshi

银虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE与蛋白质内部共价健的关系

请教一个问题，我有一个蛋白，含有二硫键的，用分析柱分析结果，聚体占70%，单体占30%，但是跑非还原的SDS-PAGE，结果聚体占60%，单体占40%。是不是能说明蛋白质聚体里面10%是非二硫键（比如可能是氢键）结合的，跑电泳的时候被打断了，转化成单体了？？？还是说蛋白内部还有非共价结合的？？？SDS-PAGE能反映蛋白内部结合的情况吗？？？
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1楼 2012-02-03 14:53:57
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yili_90

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

SDS 是sodium dodecyl sulfide.可以使蛋白质活，也就是将较大的蛋白质分开成若干亚基。他只作用于亚基之间的二硫键。第一个作用是使得亚基表面带负电，从而保证了电泳时，所有亚基都会向正极移动。第二个作用是使不带电的亚基或多肽带电，使得他能够根据自身质量不同而向正极移动不同距离

PAGE是polyacrylamide gel electrophoresis.是根据蛋白质大小不同而分离蛋白质的
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plummet
7楼2013-05-14 13:58:43
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lcppp1974

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2012-02-03 20:34:51
60%和70%是非常接近的，故不能作为差来看！而且氢键不是共价键，所以不用考虑。你说的转化为单体，一般情况下是不会的。建议你跑尿素PAGE，4 M的尿素可以打断氢键
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2楼2012-02-03 16:23:39
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花的泪

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个在误差以内，非还原SDS-PAGE 没有还原剂，不能打开二硫键
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3楼2012-02-03 16:55:41
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巫圣逸

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
刚刚开始研究这一切好陌生啊！！！！！！！
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不以物喜，不以己悲
4楼2012-02-04 21:27:36
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