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xinshi

银虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE与蛋白质内部共价健的关系

请教一个问题,我有一个蛋白,含有二硫键的,用分析柱分析结果,聚体占70%,单体占30%,但是跑非还原的SDS-PAGE,结果聚体占60%,单体占40%。是不是能说明蛋白质聚体里面10%是非二硫键(比如可能是氢键)结合的,跑电泳的时候被打断了,转化成单体了???还是说蛋白内部还有非共价结合的???SDS-PAGE能反映蛋白内部结合的情况吗???
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巫圣逸

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
刚刚开始研究这一切好陌生啊!!!!!!!
不以物喜,不以己悲
4楼2012-02-04 21:27:36
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lcppp1974

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2012-02-03 20:34:51
60%和70%是非常接近的,故不能作为差来看!而且氢键不是共价键,所以不用考虑。你说的转化为单体,一般情况下是不会的。建议你跑尿素PAGE,4 M的尿素可以打断氢键
2楼2012-02-03 16:23:39
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花的泪

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个在误差以内,非还原SDS-PAGE 没有还原剂,不能打开二硫键
3楼2012-02-03 16:55:41
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xinshi

银虫 (正式写手)

求助:氧化型谷胱甘肽,百度搜索溶解度一般是50mg/ml,分子量612.63g/M,换算出来就是0.0816mol/L,我配制饱和的氧化型谷胱甘肽,把水加到称量好谷胱甘肽的烧杯中,长时间出现白色絮状物,溶不了,加过量的水(浓度远低于饱和溶解度),还是有白色絮状物。我把烧杯中先加水,在缓慢加入谷胱甘肽,溶解的比上次好,但还是有些白色颗粒残渣。很是不解,求高人指点赐教。
5楼2013-05-12 16:42:33
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