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1楼2012-01-29 16:57:17

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humanbeeing

木虫 (著名写手)

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★
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zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-03-07 16:29:11

先要纯化出纯品，然后进行氨基酸残基测序，将测得的序列与数据库中的数据进行比对，判断是不是新酶

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4楼2012-01-30 08:57:43

普通回帖

huangjixiang

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scelab(金币+3): 基本上是这样的 2012-01-29 18:28:19

如果知道产生菌的种类和是什么类型的酶，用SDSPAGE看下分子量，用一些实验确定下酶学性质，看看和已报道的是否有差别，如果有明显差别基本可以确定是一种新的酶。
如果想进一步确认，就纯化后测末端氨基酸序列，根据氨基酸序列设计引物，把酶基因PCR出来并测序，根据序列分析是否为新的

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kether

2楼2012-01-29 17:15:40

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唯一的办法是得到氨基酸序列，其它的都是不确定的东西。

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kether

流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。

3楼2012-01-29 18:45:53

gjs713

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这个得要知道基因序列和氨基酸序列才能下定论。方法有两种，通过PCR扩增得到目的片段后进行测序；将酶进行分离纯化，拿到电泳纯的酶进行氨基酸序列测定。

勤奋、执着、专注，则无坚不破。

5楼2012-01-30 09:43:00

pph0259

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都是小朋友，

6楼2012-01-30 11:15:12

yellowred255

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新酶新特征，直接做应用是否与已知酶一样就行了，省实验省事

没有过不去的坎，没有走不到的路，加油！

7楼2012-02-10 10:14:35

kether

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引用回帖:

楼: Originally posted by huangjixiang at 2012-01-29 17:15:40:
如果知道产生菌的种类和是什么类型的酶，用SDSPAGE看下分子量，用一些实验确定下酶学性质，看看和已报道的是否有差别，如果有明显差别基本可以确定是一种新的酶。
如果想进一步确认，就纯化后测末端氨基酸序列， ...

现在酶已经纯化出来并做了N端测序，但是C端测序的技术目前还不成熟没法做，只能根据N端序列设计出一条引物，怎么能做PCR扩增出整个的酶基因呢？

8楼2012-03-06 14:15:34