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kether

新虫 (小有名气)

[求助] 通过微生物发酵得到一种酶,需要做哪些实验来鉴定是不是新酶?

通过微生物发酵得到一种酶,需要做哪些实验来鉴定是不是新酶?
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humanbeeing

木虫 (著名写手)

城市里的农村人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-03-07 16:29:11
先要纯化出纯品,然后进行氨基酸残基测序,将测得的序列与数据库中的数据进行比对,判断是不是新酶
如画如歌如酒如笑如我
4楼2012-01-30 08:57:43
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
scelab(金币+3): 基本上是这样的 2012-01-29 18:28:19
如果知道产生菌的种类和是什么类型的酶,用SDSPAGE看下分子量,用一些实验确定下酶学性质,看看和已报道的是否有差别,如果有明显差别基本可以确定是一种新的酶。
如果想进一步确认,就纯化后测末端氨基酸序列,根据氨基酸序列设计引物,把酶基因PCR出来并测序,根据序列分析是否为新的

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-01-29 17:15:40
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

唯一的办法是得到氨基酸序列,其它的都是不确定的东西。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-01-29 18:45:53
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个得要知道基因序列和氨基酸序列才能下定论。方法有两种,通过PCR扩增得到目的片段后进行测序;将酶进行分离纯化,拿到电泳纯的酶进行氨基酸序列测定。
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
5楼2012-01-30 09:43:00
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