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加急!!怎么测量固体发酵培养基的酶活,氨基酸含量和蛋白含量!
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cjlovesen
铜虫
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[交流]
加急!!怎么测量固体发酵培养基的酶活,氨基酸含量和蛋白含量!
最近在做固态发酵的实验,我们要测量发酵培养基的酶活,氨基酸含量和蛋白含量,但是发酵培养基是固态的,所以对测量来说造成了难度,我想大家都怎么做的啊?谢谢!!特别急,大家快点回复啊!!
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酶活与酶蛋白含量关系
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1楼
2011-11-14 22:54:07
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lizhengpeng71
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cjlovesen(金币+5): 谢谢回帖 2011-11-15 12:56:13
用缓冲液浸提后,测缓冲液中的就可以了
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2楼
2011-11-15 08:42:56
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cjlovesen(金币
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):谢谢参与
同上,灰常的低端,灰常的简单。最后折算成U/g就行了。
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3楼
2011-11-15 09:49:22
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cjlovesen
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2楼
:
Originally posted by
lizhengpeng71
at 2011-11-15 08:42:56:
用缓冲液浸提后,测缓冲液中的就可以了
因为我没做过这个,我要用什么缓冲液呢?浸提时间是多长呢?因为我们是要连续的测量,这种方法只能测一次的,所以不太实用,不过还是谢谢,能详细点吗?如果没有更好的我们就只能用这种方法了!!
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4楼
2011-11-15 12:57:42
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stone_f
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zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-16 21:32:56
固体培养基一般都是浸提测的,用什么缓冲液要看你的酶活检测方法中需要用多少pH值的了。连续测量可以选择多做几个平行,每个取样点取样2-3个样或者每次挖取一小块,你可以参考国标法中常用的固形物中某些物质含量的检测方法,如微生物总量的检测。至于氨基酸和蛋白含量的话由于培养基本身的影响可能不好检测
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5楼
2011-11-16 19:06:32
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宋某
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cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我们做酶制剂的,一般固体粉末检测,就是用缓冲液溶解了,然后用滤纸静态过滤就可以了,做一定的稀释倍数就可以了...
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6楼
2012-05-09 16:44:23
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cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我想问一下,固体的会不会不均匀?就是取了菌丝周围的,会不会也会出现不均匀现象?
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7楼
2014-10-30 10:06:35
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冼亮淀粉酶
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配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液,接种多瓶,每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎,常温摇床浸提,全瓶离心取上清液,上清液定容至相同体积,此时再测定需要的参数。
做实验不能马虎,别像玩似的。
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8楼
2014-10-30 14:25:16
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街角拽幸福
木虫
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8楼
:
Originally posted by
冼亮淀粉酶
at 2014-10-30 14:25:16
配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液,接种多瓶,每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎,常温摇床浸提,全瓶离心取上清液,上清液定容至相同体积,此时再测定需要的参数。
做实验不能马虎,别像玩似的。
什么意思?没明白。。。
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9楼
2014-10-30 15:39:09
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wsliuleilei
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gogen
at 2011-11-15 09:49:22
同上,灰常的低端,灰常的简单。最后折算成U/g就行了。
想问下您,固体发酵的淀粉酶活如何测定啊,固体发酵物里面本身有淀粉甚至含量比较高,这个干扰因素如何排除?
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10楼
2018-11-11 12:31:44
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