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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 加急！！怎么测量固体发酵培养基的酶活，氨基酸含量和蛋白含量！
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cjlovesen

铜虫 (小有名气)

[交流] 加急！！怎么测量固体发酵培养基的酶活，氨基酸含量和蛋白含量！

最近在做固态发酵的实验，我们要测量发酵培养基的酶活，氨基酸含量和蛋白含量，但是发酵培养基是固态的，所以对测量来说造成了难度，我想大家都怎么做的啊？谢谢！！特别急，大家快点回复啊！！
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1楼 2011-11-14 22:54:07
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lizhengpeng71

木虫 (正式写手)
★
cjlovesen(金币+1):谢谢参与
cjlovesen(金币+5): 谢谢回帖 2011-11-15 12:56:13
用缓冲液浸提后，测缓冲液中的就可以了
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2楼2011-11-15 08:42:56
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gogen

金虫 (小有名气)
★
cjlovesen(金币+1):谢谢参与
同上，灰常的低端，灰常的简单。最后折算成U/g就行了。
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3楼2011-11-15 09:49:22
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cjlovesen

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lizhengpeng71 at 2011-11-15 08:42:56:
用缓冲液浸提后，测缓冲液中的就可以了

因为我没做过这个，我要用什么缓冲液呢？浸提时间是多长呢?因为我们是要连续的测量，这种方法只能测一次的，所以不太实用，不过还是谢谢，能详细点吗？如果没有更好的我们就只能用这种方法了！！
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4楼2011-11-15 12:57:42
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stone_f

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
cjlovesen(金币+1):谢谢参与
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-16 21:32:56
固体培养基一般都是浸提测的，用什么缓冲液要看你的酶活检测方法中需要用多少pH值的了。连续测量可以选择多做几个平行，每个取样点取样2-3个样或者每次挖取一小块，你可以参考国标法中常用的固形物中某些物质含量的检测方法，如微生物总量的检测。至于氨基酸和蛋白含量的话由于培养基本身的影响可能不好检测
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5楼2011-11-16 19:06:32
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宋某

铜虫 (初入文坛)
★
cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我们做酶制剂的，一般固体粉末检测，就是用缓冲液溶解了，然后用滤纸静态过滤就可以了，做一定的稀释倍数就可以了...
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6楼2012-05-09 16:44:23
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街角拽幸福

木虫 (小有名气)
★
cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我想问一下，固体的会不会不均匀？就是取了菌丝周围的，会不会也会出现不均匀现象？
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7楼2014-10-30 10:06:35
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液，接种多瓶，每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎，常温摇床浸提，全瓶离心取上清液，上清液定容至相同体积，此时再测定需要的参数。


做实验不能马虎，别像玩似的。
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8楼2014-10-30 14:25:16
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街角拽幸福

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-10-30 14:25:16
配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液，接种多瓶，每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎，常温摇床浸提，全瓶离心取上清液，上清液定容至相同体积，此时再测定需要的参数。


做实验不能马虎，别像玩似的。

什么意思？没明白。。。
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9楼2014-10-30 15:39:09
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wsliuleilei

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by gogen at 2011-11-15 09:49:22
同上，灰常的低端，灰常的简单。最后折算成U/g就行了。

想问下您，固体发酵的淀粉酶活如何测定啊，固体发酵物里面本身有淀粉甚至含量比较高，这个干扰因素如何排除？

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10楼2018-11-11 12:31:44
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