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cjlovesen

铜虫 (小有名气)


[交流] 加急!!怎么测量固体发酵培养基的酶活,氨基酸含量和蛋白含量!

最近在做固态发酵的实验,我们要测量发酵培养基的酶活,氨基酸含量和蛋白含量,但是发酵培养基是固态的,所以对测量来说造成了难度,我想大家都怎么做的啊?谢谢!!特别急,大家快点回复啊!!
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lizhengpeng71

木虫 (正式写手)



cjlovesen(金币+1):谢谢参与
cjlovesen(金币+5): 谢谢回帖 2011-11-15 12:56:13
用缓冲液浸提后,测缓冲液中的就可以了
2楼2011-11-15 08:42:56
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gogen

金虫 (小有名气)



cjlovesen(金币+1):谢谢参与
同上,灰常的低端,灰常的简单。最后折算成U/g就行了。
3楼2011-11-15 09:49:22
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cjlovesen

铜虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by lizhengpeng71 at 2011-11-15 08:42:56:
用缓冲液浸提后,测缓冲液中的就可以了

因为我没做过这个,我要用什么缓冲液呢?浸提时间是多长呢?因为我们是要连续的测量,这种方法只能测一次的,所以不太实用,不过还是谢谢,能详细点吗?如果没有更好的我们就只能用这种方法了!!
4楼2011-11-15 12:57:42
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stone_f

铜虫 (初入文坛)


★ ★ ★ ★ ★ ★
cjlovesen(金币+1):谢谢参与
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-16 21:32:56
固体培养基一般都是浸提测的,用什么缓冲液要看你的酶活检测方法中需要用多少pH值的了。连续测量可以选择多做几个平行,每个取样点取样2-3个样或者每次挖取一小块,你可以参考国标法中常用的固形物中某些物质含量的检测方法,如微生物总量的检测。至于氨基酸和蛋白含量的话由于培养基本身的影响可能不好检测
5楼2011-11-16 19:06:32
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宋某

铜虫 (初入文坛)



cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我们做酶制剂的,一般固体粉末检测,就是用缓冲液溶解了,然后用滤纸静态过滤就可以了,做一定的稀释倍数就可以了...
6楼2012-05-09 16:44:23
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街角拽幸福

木虫 (小有名气)



cjlovesen(金币+1): 谢谢参与
我想问一下,固体的会不会不均匀?就是取了菌丝周围的,会不会也会出现不均匀现象?
7楼2014-10-30 10:06:35
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液,接种多瓶,每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎,常温摇床浸提,全瓶离心取上清液,上清液定容至相同体积,此时再测定需要的参数。


做实验不能马虎,别像玩似的。
8楼2014-10-30 14:25:16
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街角拽幸福

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-10-30 14:25:16
配制某个浓度的真菌孢子/细菌菌体液,接种多瓶,每个时间点取3瓶加水或缓冲液用粉碎机粉碎,常温摇床浸提,全瓶离心取上清液,上清液定容至相同体积,此时再测定需要的参数。


做实验不能马虎,别像玩似的。

什么意思?没明白。。。
9楼2014-10-30 15:39:09
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wsliuleilei

铁虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by gogen at 2011-11-15 09:49:22
同上,灰常的低端,灰常的简单。最后折算成U/g就行了。

想问下您,固体发酵的淀粉酶活如何测定啊,固体发酵物里面本身有淀粉甚至含量比较高,这个干扰因素如何排除?

发自小木虫Android客户端
10楼2018-11-11 12:31:44
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