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lihengyang86

铜虫 (小有名气)

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[交流] 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称       浓度（ng/μL） A260/280                A260/230
质粒1                      24                      1.97                         1.17
质粒2                      47.4                   1.93                         1.56
质粒3                      41.8                   1.98                         1.50

以上是今天提取的质粒的相关测定指标，请大家据此数据帮忙分析一下！个人感觉数值很不理想！提取的很不成功！

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1楼 2012-01-07 23:45:28

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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

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★
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引用回帖:

29楼: Originally posted by dongniaoxin at 2012-04-11 13:16:36:
我是个新手，想问一下质粒的大提和小提应用范围有何不同，还有影响质粒大提所得质粒浓度的具体因素都有哪些，谢谢

应用范围来说，主要看你的需要了，如果你要20ug以下，小提的量就足够了，100ug以下，你可以小提多提几个，也很快的，如果不超过200ug或200ug左右，估计一个中提的量也够了，800ug以上，那只有大提了。另外也要看你所需要质粒的质量了，没有特殊要求，普通的试剂盒就可以，如果盐要少，那提的时候就要多洗两次，如果要去内毒素，就要用去内毒素的试剂盒。
影响大提所提质粒的量主要跟菌体培养、所用试剂盒和质粒提取的操方有关；菌体的用量是在试剂盒允许的范围内越多越好，当然了，高考贝质粒的话，可能用一半的菌体量所得的质粒就会超出柱子的承载能力，就没有必要培养那么多菌了；现在很多的试剂盒的说明书都不是最优的操作方法，完全可以大胆的改进