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新提的质粒DNA,关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧
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lihengyang86
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[交流]
新提的质粒DNA,关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧
质粒名称 浓度(ng/μL) A260/280 A260/230
质粒1 24 1.97 1.17
质粒2 47.4 1.93 1.56
质粒3 41.8 1.98 1.50
以上是今天提取的质粒的相关测定指标,请大家据此数据帮忙分析一下!个人感觉数值很不理想!提取的很不成功!
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2012-01-07 23:45:28
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ganchao1776
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引用回帖:
29楼
:
Originally posted by
dongniaoxin
at 2012-04-11 13:16:36:
我是个新手,想问一下质粒的大提和小提应用范围有何不同,还有影响质粒大提所得质粒浓度的具体因素都有哪些,谢谢
应用范围来说,主要看你的需要了,如果你要20ug以下,小提的量就足够了,100ug以下,你可以小提多提几个,也很快的,如果不超过200ug或200ug左右,估计一个中提的量也够了,800ug以上,那只有大提了。另外也要看你所需要质粒的质量了,没有特殊要求,普通的试剂盒就可以,如果盐要少,那提的时候就要多洗两次,如果要去内毒素,就要用去内毒素的试剂盒。
影响大提所提质粒的量主要跟菌体培养、所用试剂盒和质粒提取的操方有关;菌体的用量是在试剂盒允许的范围内越多越好,当然了,高考贝质粒的话,可能用一半的菌体量所得的质粒就会超出柱子的承载能力,就没有必要培养那么多菌了;现在很多的试剂盒的说明书都不是最优的操作方法,完全可以大胆的改进
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30楼
2012-04-12 09:46:35
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lixingliang
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浓度怎么这么低呢,请问你的质粒是低拷贝的吗,是小抽,还是中抽,抑或大抽
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2楼
2012-01-08 07:59:19
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lixingliang
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lihengyang86(金币+1): 摇菌10h,用了4mL菌液提的。 2012-01-08 10:52:22
西瓜(金币+1): 鼓励交流! 2012-01-08 16:55:39
还有请问你摇菌多长时间啊,用多少毫升菌液抽得啊
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3楼
2012-01-08 08:00:06
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lyd0311
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手提还是试剂盒 用的什么公司的
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5楼
2012-01-08 09:46:31
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