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Kwangene_Xin

铁虫 (初入文坛)


[交流] 有没有办法让PCR跑出实验室?

!!!家人们,在线求助。

众所周知PCR是检测界六边形战士,灵敏度特异性都在线,但它有个debuff:实验室限定皮肤。

热循环仪一摆、分区实验室一划、移液操作一套,样本基本就被“封印”在墙里了。扩增动辄1—3小时,加上前后处理,半天没了。更别说开盖污染风险随步骤线性上升。

然而在基层现场、急诊床旁、田间地头明明有需求,PCR却常常“出门即失联”——设备不好扛,变温KPI完不成,人还得trained。

我就在想:核酸扩增非得变温吗?非得靠热循环仪“烤”吗?

目前已知RPA(重组酶聚合酶扩增)可以像个物理外挂带出实验室:用重组酶蛋白替掉热变性那一步,37—42℃恒温,10—30分钟扩增,不需要热循环仪。引物设计简单,操作门槛降下来,还能冻干成常温稳定试剂,往没冷链的地方带。

当然,RPA定量和标准化体系仍有差距,但现场能直接快速测出结果,这个方便点。

求问做现场检测的同行:你们那儿PCR最卡脖子的是哪一趴?如果换RPA恒温扩增,最担心啥问题?

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可以直接联系我:15821572946
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