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lihengyang86

铜虫 (小有名气)


[交流] 新提的质粒DNA,关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称        浓度(ng/μL)    A260/280                 A260/230
质粒1                       24                        1.97                           1.17
质粒2                       47.4                     1.93                           1.56
质粒3                       41.8                     1.98                           1.50


以上是今天提取的质粒的相关测定指标,请大家据此数据帮忙分析一下!个人感觉数值很不理想!提取的很不成功!
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)


★ ★
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小丹木木(金币+1): 感谢积极交流哦 2012-01-11 08:19:16
lihengyang86(金币+2): 谢谢!我就是小提!另外,想请问为啥提质粒时,不是A值越高越好?! 2012-01-11 16:19:18
因为我提的质粒没有超出这个范围的,转化细胞都很好,有同事提的超出了这个范围,出了些意外,但是不能确定是不是质粒的问题,但是没有找到其它原因,所以就都当是这个的原因了。

如果你是小提的话,单菌落接3ml的LB37度过液就没有问题的,如果你是中提或大提的话,种子长到A600 1.2左右,200ml/50ml培养基,接20ul,摇床180rpm,过夜,大概长到1.8左右吧,这样就可以了
19楼2012-01-10 23:54:31
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lixingliang

新虫 (小有名气)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
浓度怎么这么低呢,请问你的质粒是低拷贝的吗,是小抽,还是中抽,抑或大抽
2楼2012-01-08 07:59:19
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lixingliang

新虫 (小有名气)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
lihengyang86(金币+1): 摇菌10h,用了4mL菌液提的。 2012-01-08 10:52:22
西瓜(金币+1): 鼓励交流! 2012-01-08 16:55:39
还有请问你摇菌多长时间啊,用多少毫升菌液抽得啊
3楼2012-01-08 08:00:06
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lyd0311

银虫 (小有名气)


★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
手提还是试剂盒 用的什么公司的
5楼2012-01-08 09:46:31
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