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lihengyang86

铜虫 (小有名气)

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[交流] 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称       浓度（ng/μL） A260/280                A260/230
质粒1                      24                      1.97                         1.17
质粒2                      47.4                   1.93                         1.56
质粒3                      41.8                   1.98                         1.50

以上是今天提取的质粒的相关测定指标，请大家据此数据帮忙分析一下！个人感觉数值很不理想！提取的很不成功！

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1楼 2012-01-07 23:45:28

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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励交流。1.78,1.93，这么精确啊 2012-01-09 17:53:45
lihengyang86(金币+2): 那要是这样的话，我提的效率很低了！4mL菌液才提了不到4μg！请问你摇菌大概多长时间？！ 2012-01-10 14:49:12

康为的试剂盒还是不错的；对于低拷贝数很低的质粒，每ml菌液至少也能提个3到4ug质粒的，对于所提取质粒的质量，A260/A230的值在1.85左右是最好的，低于1.78高于1.93对细胞转化都会有影响，要是酶切或转化大肠的话，可能没有什么影响吧。质粒提取的关键在菌体的培养，一般培养到菌液A600在2.0左右为最好，高于2.5会影响质粒的拷贝数，低于1.5所收的菌量太少。