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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧
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lihengyang86

铜虫 (小有名气)

[交流] 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称        浓度（ng/μL）    A260/280                 A260/230
质粒1                       24                        1.97                           1.17
质粒2                       47.4                     1.93                           1.56
质粒3                       41.8                     1.98                           1.50


以上是今天提取的质粒的相关测定指标，请大家据此数据帮忙分析一下！个人感觉数值很不理想！提取的很不成功！
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1楼 2012-01-07 23:45:28
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 鼓励交流。1.78,1.93，这么精确啊 2012-01-09 17:53:45
lihengyang86(金币+2): 那要是这样的话，我提的效率很低了 ！4mL菌液才提了不到4μg！请问你摇菌大概多长时间？！ 2012-01-10 14:49:12
康为的试剂盒还是不错的；对于低拷贝数很低的质粒，每ml菌液至少也能提个3到4ug质粒的，对于所提取质粒的质量，A260/A230的值在1.85左右是最好的，低于1.78高于1.93对细胞转化都会有影响，要是酶切或转化大肠的话，可能没有什么影响吧。质粒提取的关键在菌体的培养，一般培养到菌液A600在2.0左右为最好，高于2.5会影响质粒的拷贝数，低于1.5所收的菌量太少。
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18楼2012-01-09 17:36:13
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lixingliang

新虫 (小有名气)
★
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浓度怎么这么低呢，请问你的质粒是低拷贝的吗，是小抽，还是中抽，抑或大抽
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2楼2012-01-08 07:59:19
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lixingliang

新虫 (小有名气)
★ ★
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lihengyang86(金币+1): 摇菌10h，用了4mL菌液提的。 2012-01-08 10:52:22
西瓜(金币+1): 鼓励交流！ 2012-01-08 16:55:39
还有请问你摇菌多长时间啊，用多少毫升菌液抽得啊
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3楼2012-01-08 08:00:06
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lyd0311

银虫 (小有名气)
★
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手提还是试剂盒 用的什么公司的
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5楼2012-01-08 09:46:31
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