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lihengyang86

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 557.5
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在线: 92.3小时
虫号: 1074442

[交流] 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称       浓度（ng/μL） A260/280                A260/230
质粒1                      24                      1.97                         1.17
质粒2                      47.4                   1.93                         1.56
质粒3                      41.8                   1.98                         1.50

以上是今天提取的质粒的相关测定指标，请大家据此数据帮忙分析一下！个人感觉数值很不理想！提取的很不成功！

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1楼 2012-01-07 23:45:28

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longrna

新虫 (正式写手)

MolEPI: 7
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虫号: 1473815

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！辛苦！ 2012-01-08 16:58:17
lihengyang86(金币+3): PET42a大小为5930bp，插入片段也就680bp左右。属不属于严紧型质粒倒不是很清楚。多谢您的关注和建议。 2012-01-08 18:15:05

4ml 菌只拿到了不到4ug的质粒～
PET42a 6k? 插入片段多大？整个质粒多大？属于低拷贝不？
如果属于低拷贝，这个产量也说得过去。

有两种思路：
1）你用同样的操作及kit 提一个正常（高拷贝的质粒）的菌液，看产量是否有问题，如没问题则说明你的菌“有问题”（：本身质粒的拷贝数低问题）
2）如果是本身菌质粒拷贝数低的问题，则另想解决办法：如优化摇菌时间，用营养丰富的培养基，培养提取时的菌液用量或直接中提等等。