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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧
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lihengyang86

铜虫 (小有名气)

[交流] 新提的质粒DNA，关于浓度和纯度虫友们发表一些看法吧

质粒名称        浓度（ng/μL）    A260/280                 A260/230
质粒1                       24                        1.97                           1.17
质粒2                       47.4                     1.93                           1.56
质粒3                       41.8                     1.98                           1.50


以上是今天提取的质粒的相关测定指标，请大家据此数据帮忙分析一下！个人感觉数值很不理想！提取的很不成功！
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1楼 2012-01-07 23:45:28
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longrna

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！辛苦！ 2012-01-08 16:58:17
lihengyang86(金币+3): PET42a大小为5930bp，插入片段也就680bp左右。属不属于严紧型质粒倒不是很清楚。多谢您的关注和建议。 2012-01-08 18:15:05
4ml 菌只拿到了不到4ug的质粒～
PET42a  6k? 插入片段多大？整个质粒多大？属于低拷贝不？
如果属于低拷贝，这个产量也说得过去。

有两种思路：
1）你用同样的操作及kit 提一个正常（高拷贝的质粒）的菌液，看产量是否有问题，如没问题则说明你的菌“有问题”（：本身质粒的拷贝数低问题）
2）如果是本身菌质粒拷贝数低的问题，则另想解决办法：如优化摇菌时间，用营养丰富的培养基，培养提取时的菌液用量或直接中提等等。
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13楼2012-01-08 16:18:36
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lixingliang

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
浓度怎么这么低呢，请问你的质粒是低拷贝的吗，是小抽，还是中抽，抑或大抽
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2楼2012-01-08 07:59:19
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lixingliang

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
lihengyang86(金币+1): 摇菌10h，用了4mL菌液提的。 2012-01-08 10:52:22
西瓜(金币+1): 鼓励交流！ 2012-01-08 16:55:39
还有请问你摇菌多长时间啊，用多少毫升菌液抽得啊
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3楼2012-01-08 08:00:06
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lyd0311

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
手提还是试剂盒 用的什么公司的
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5楼2012-01-08 09:46:31
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