| 查看: 2280 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
提RNA反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来
|
||
|
各位大侠，我最近提了RAW264.7细胞的RNA，反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来。 第一次加了6微升DEPC水溶解RNA，然后取5微升RNA溶液作RT-PCR（20微升体系），再分别用GAPDH和TLR2进行PCR。 图见1 第二次取500ng 小鼠肺组织、RAW264.7细胞的总RNA，进行逆转，用的是M-MLV的酶，按照protocol上的10微升体系，在用TLR1和GAPDH进行PCR。结果还是只有很亮的GAPDH，不过两次PCR都有很多引物二聚体。 见图2 谁能告诉我这到底是为什么呀~~~  1 MARKER 1RAW(GAPDH tlr2) 2RAW(GAPDH tlr2)  2 MARKER TLR1(肺 1RAW 2RAW) GAPDH(肺 1RAW 2RAW).jpg |
回复此楼» 本帖@通知
» 猜你喜欢
二氟乙酸乙酯还原成二氟乙醛缩半乙醇
已经有7人回复
-
上海交通大学凌代舜教授/山西医科大学卞伟教授 联合招收2026级博士研究生
已经有0人回复
-
检验医学论文润色/翻译怎么收费?
已经有265人回复
-
审稿快的SCI医学期刊推荐
已经有0人回复
-
审稿快的SCI医学期刊
已经有0人回复
-
如何把这个结构弄消旋
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr
已经有9人回复
- 大家帮忙看一下 这个反应为什么不能进行
已经有6人回复
- PCR常见问题分析
已经有7人回复
- 我的pcr产物怎么跟瀑布一样，究竟是为什么
已经有46人回复
- 新手提RNA，电泳图看不懂
已经有18人回复
- RNA提取的问题么
已经有4人回复
- 请高手看看我的PCR图片
已经有28人回复
- 新手提RNA，请教几个问题
已经有8人回复
- 国内有哪家单位研究microRNA与肿瘤的关系比较深？
已经有5人回复
- 做PCR，25μL体系和50μL体系，哪个比较稳定呢？
已经有19人回复
- 【分享】《RNA世界》
已经有11人回复
- PCR电泳图怎么会这样？各位帮忙分析一下吧
已经有12人回复
- pcr目的条带弱，而dimer很亮，怎么调整呢？
已经有6人回复
- 【求助/交流】提RNA后用DNase消化后PCR仍有目的条带，该如何避免呢？
已经有13人回复
10楼2012-01-10 09:22:54
lihegang2000
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 6452.8
- 散金: 300
- 红花: 4
- 帖子: 631
- 在线: 377.6小时
- 虫号: 311541
- 注册: 2006-12-30
- 性别: GG
- 专业: 免疫遗传学
2楼2012-01-08 09:36:37
3楼2012-01-08 10:23:36
4楼2012-01-08 10:59:05
10
