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zhouxw1987

铁虫 (初入文坛)

[求助] 新手提RNA,电泳图看不懂

今天第一次提RNA,用普通琼脂糖凝胶1.6%,电压为180V,跑了电泳图,看不懂是啥意思,最下面那个很亮的地方是什么东西?是降解了么?但是又不像是拖带啊?请各位前辈指点指点,能用此RNA做反转录么?万分感谢!
 
图一、电泳5min时的图片
 
图二、电泳10min时的图片
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-12-26 11:44:04
zhouxw1987(金币+2): ★★★很有帮助 2011-12-27 20:30:11
首先你上样量肯定有点多相对你此胶的点样孔来说。你小孔的胶先测一下OD,上200-300ng就可以了,上多了就会跑成这样。
其次你的电泳可能有点大,10min跑了那么远,一般要了20-25min才能跑这样的距离。电压是以几伏每厘米来说的,不是以电泳仪显示的总电压来说。电泳槽有10cm\20cm\30cm等等的规格,如果你是180v,则分别为18v/cm,9v/cm,6v/cm了,完全不同的概念。
最后,你的loading如果不是你点多了就是你的二甲苯青和溴酚兰加多了,多到都有点影响判断条带了。6Xloading 你就按1:5跟你的样品混混上就行了。新手最好也点个marker(DL2000)
伟大航线....
6楼2011-12-26 09:28:38
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查看全部 19 个回答

我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
只有5s 貌似全降解了~~~我感觉是。LS回答吧
2楼2011-12-25 20:48:10
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dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-26 11:42:29
西瓜: 回帖置顶 2011-12-28 12:49:31
西瓜(金币+3): Good! 2011-12-28 12:49:41
你这个提的不好,从上到下一次是28s, 18s 和5s,你的28s和18s条带很弱,基本上都是5s。不知道你想做什么实验,如果还有原材料再提一次吧,如果没有那就只好用这个来扩增你的目的基因了
3楼2011-12-26 07:09:40
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julietguo

银虫 (正式写手)

我最近一次提的RNA也是,反转录之后做PCR,得到的条带连100bp都不到,真怀疑是不是降解了
4楼2011-12-26 08:19:37
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