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Icityman

铁虫 (小有名气)


[交流] 关于PCR拖尾现象

PCR跑出来是这个现象,体系优化了不少次,梯度降落都做过了,还是这样,求高手帮忙解决,谢谢啊!!

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没想好名字

新虫 (初入文坛)



Icityman(金币+1): 谢谢参与
这不是拖尾,因为压根就没有主条带。分析原因:1.模板分解了,且浓度过高2.引物的特异性太差3.退火温度过低,可采用Tm-10x5+Tm-2x30试试,并逐渐改变退火温度。
23楼2015-05-08 11:21:58
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harben

银虫 (初入文坛)



Icityman(金币+1):谢谢参与
引物设计有问题,换引物是最好最快的选择
2楼2011-12-22 16:41:21
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Icityman

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by harben at 2011-12-22 16:41:21:
引物设计有问题,换引物是最好最快的选择

可是有拖尾不就是有克隆吗?
3楼2011-12-22 18:04:24
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
Icityman(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-12-23 23:44:29
你这不是叫拖尾,根本就没有你的目的条带,不知道你是以什么为模版p的,如果是菌液的话就提取质粒为模版再试试,如果是质粒或DNA的话尝试着稀释100倍-1000倍再P下试试,前提是确认你的引物没问题,要不就是克隆里没的你目的片段
4楼2011-12-22 19:19:35
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