24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2702  |  回复: 22
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

flytime1115

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有木有人做过Taqman 探针法Real-Time??已有1人参与

我要检测基因组中插入的某个外源片段的拷贝数,需要做绝对定量。师兄建议不要用sybr 燃料做,建议用探针法做。现在毫无头绪,不知道怎么设计,怎么合成?望各位高人指点一下……
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

austin2008

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 感谢参与交流 2011-12-24 17:09:48
wanhscn(金币+2): 感谢参与交流 2011-12-24 17:11:02
我做过检测重组毕赤酵母中外源基因拷贝数的实验,用的就是探针法,内参用的是GAPDH,检测的准确度和重复性还是很好的!引物和探针你自己不要设计,交给专业的设计公司设计和合成,也不是很贵,国内的公司一套探针引物(包括上下游引物,探针)也就1200+吧,国外的ABI等公司合成一般要贵一倍左右,一般可以做1500-2000个样品。SYBY法不是很准确,精确定量最好还是用探针法,我的实验用的样品的基因组DNA和你的不大一样,不过原理差不多的。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

优秀是一种习惯;生命是一种过程;放弃是一种智慧;缺点是一种恩惠!
9楼2011-12-23 09:16:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计引物探针,构建质粒,定量
2楼2011-12-22 16:45:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-22 18:29:07
楼主做的是专基因检测吗?如果是,那不建议用荧光定量,主流的方法用SOUTHERN杂交。TAQMAN可以让公司设计合成,sybr法也能做,两种方法没有质变
3楼2011-12-22 18:04:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

flytime1115

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by shaquila at 2011-12-22 18:04:14:
楼主做的是专基因检测吗?如果是,那不建议用荧光定量,主流的方法用SOUTHERN杂交。TAQMAN可以让公司设计合成,sybr法也能做,两种方法没有质变

是做转基因检测,southern杂交在做,可是无法确定拷贝数,仅仅根据灰度值判断,觉得不太靠谱
4楼2011-12-22 19:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见