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sandisk411

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-12-24 15:28:26
TaqMAN法和SYB法都可以用于检测拷贝数,关键是你能不能设计出合适的探针。用RT-PCR法鉴定拷贝数需要你对材料非常了解,比如是转基因T0代,如果是单拷贝的,插入目的基因与参考基因(基因组里单拷贝)的比值应是1:2;双拷贝的,就该是1:1;如果T1代,RT-PCR用于单株分析时,情况会很复杂,可以说你将无法准确判断,除非你已知是纯合的单株。
对于遗传背景不清楚的,你最好用SOURTHERN杂交确认,这是最可靠和简单的方法了。
要不,你可以尝试,把插入片段的左、右两边的序列给克隆测序。

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16楼2011-12-24 12:11:26
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