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sandisk411

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【答案】应助回帖

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西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-12-24 15:28:26
TaqMAN法和SYB法都可以用于检测拷贝数，关键是你能不能设计出合适的探针。用RT-PCR法鉴定拷贝数需要你对材料非常了解，比如是转基因T0代，如果是单拷贝的，插入目的基因与参考基因（基因组里单拷贝）的比值应是1:2；双拷贝的，就该是1:1；如果T1代，RT-PCR用于单株分析时，情况会很复杂，可以说你将无法准确判断，除非你已知是纯合的单株。
对于遗传背景不清楚的，你最好用SOURTHERN杂交确认，这是最可靠和简单的方法了。
要不，你可以尝试，把插入片段的左、右两边的序列给克隆测序。
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flytime1115
16楼2011-12-24 12:11:26
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